[发明专利]一种宽叶羌活的HPLC检测方法

说明书

本发明提供了一种宽叶羌活的HPLC检测方法。本发明的宽叶羌活HPLC检测方法，能同时检测宽叶羌活药材中的5种成分，且本法操作简单，精密度高，稳定性好，重复性好，准确度高，可以有效地评价宽叶羌活药材的质量。

技术领域

本发明具体涉及一种宽叶羌活的HPLC检测方法。

背景技术

宽叶羌活Notopterygium franchetii H.de Boiss.为伞形科羌活属多年生草本植物，俗称黑药，药用部位主要为其干燥根茎及根，主要分布在四川西北部、青海、甘肃、西藏东部等高原地区。在临床上常用于治疗风寒感冒、头痛、风湿痹痛等症。现代研究表明宽叶羌活药材具有抗炎、镇痛解热、抗心律失常、抗心肌缺血和抗菌等作用。挥发油、香豆素类、有机酸类化合物是宽叶羌活中最主要的三大类活性成分。研究发现阿魏酸具有抗炎、抗氧化、抗辐射和抗肿瘤等作用；羌活醇和异欧前胡素具有镇痛、舒张血管、抗病毒活性作用；紫花前胡苷有镇痛、抗炎、改善学习记忆等作用；佛手柑内酯有抗衰老、抗肿瘤等作用。

关于宽叶羌活药材的成分含量测定已有许多报道，但只是测定其中的2或3种成分，如高建邦，宋平顺，郁霞.HPLC法同时测定羌活中异欧前胡素和阿魏酸含量[J].中药材，2010,33(02):231-233.，同时测定了异欧前胡素和阿魏酸的含量。目前中国药典2015年版一部主要以羌活醇和异欧前胡素的含量之和控制宽叶羌活药材的质量。众所周知中药的多效性源于其复杂的化学成分，仅靠一两个成分的含量测定不能反映其他成分的情况，难以真正控制其质量。选择更多的成分作为指标进行质量控制研究，更能合理、全面评价宽叶羌活药材质量。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种宽叶羌活的HPLC检测方法。

本发明的宽叶羌活HPLC检测方法，包括如下操作步骤：

1)对照品溶液制备：取对照品，溶解，即得对照品溶液；

2)供试品溶液制备：取宽叶羌活药材，提取，即得供试品溶液；

3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，色谱条件如下：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：310～320nm；流动相：0.2～0.4％醋酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B；梯度洗脱程序如下：

其中，步骤1)所述对照品包括：紫花前胡苷对照品、阿魏酸对照品、佛手柑内酯对照品、羌活醇对照品、异欧前胡素对照品。

其中，步骤1)所述溶解是加入甲醇溶解。

其中，步骤2)所述提取是指：加入甲醇，超声提取。

其中，步骤2)所述提取方法如下：

取宽叶羌活药材，加入药材60～100w/v(g/ml)倍的甲醇，超声提取10～60分钟，放冷，用甲醇补足减失的质量，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

进一步地，所述提取方法如下：

取宽叶羌活药材粉末，置具塞锥形瓶中，精密加入药材83w/v(g/ml)倍的甲醇，称定其质量，超声提取30分钟，放冷，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得供试品溶液。

其中，所用色谱柱为GL Sciences Wondasil C18色谱柱；规格为4.6mm×250mm，5μm。

其中，所述检测波长为315nm。

其中，所述流动相A为0.3％醋酸水溶液。

其中，所述色谱条件还包括：