[发明专利]一种抗PD-L1人源化纳米抗体及其应用

权利要求书

1.一种抗PD-L1纳米抗体的VHH链，其特征在于，所述VHH链包括互补决定区CDR，所述的互补决定区CDR包括SEQ ID NO:5所示的CDR1，SEQ ID NO:6所示的CDR2，和SEQ ID NO:7所示的CDR3。

2.如权利要求1所述的VHH链，其特征在于，所述VHH链还包括框架区FR，所述的框架区FR含有

(a)SEQ ID NO:1所示的FR1，SEQ ID NO:2所示的FR2，SEQ ID NO:3所示的FR3，SEQ IDNO:4所示的FR4；或

(b)SEQ ID NO:10所示的FR1，SEQ ID NO:11所示的FR2，SEQ ID NO:12所示的FR3，SEQID NO:13所示的FR4。

3.如权利要求1所述的VHH链，其特征在于，所述的抗PD-L1纳米抗体的VHH链的氨基酸序列如SEQ ID NO:8或14所示。

4.一种抗PD-L1纳米抗体，其特征在于，它是针对PD-L1表位的纳米抗体，并且具有如SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:14中所示的氨基酸序列的VHH链。

5.一种多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码选自下组的蛋白质：权利要求1所述的抗PD-L1纳米抗体的VHH链或权利要求4所述的抗PD-L1纳米抗体。

6.如权利要求5所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸具有如SEQ ID NO:9或15所示的核苷酸序列。

7.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有权利要求5所述的多核苷酸。

8.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求7所述的表达载体，或其基因组中整合有权利要求5所述的多核苷酸。

9.一种产生抗PD-L1纳米抗体的方法，其特征在于，包括步骤：

(a)在适合产生纳米抗体的条件下，培养权利要求8所述的宿主细胞，从而获得含所述抗PD-L1纳米抗体的培养物；以及

(b)从所述培养物中分离或回收所述的抗PD-L1纳米抗体。

10.一种多肽，其特征在于，所述多肽含有：

(a)如权利要求1所述的抗PD-L1纳米抗体的VHH链、或如权利要求4所述的抗PD-L1纳米抗体；

(b)任选的、与所述多肽结合或偶联的选自下组的修饰标记物：化学标记物或生物标记物。

11.一种免疫偶联物，其特征在于，该免疫偶联物含有：

(a)如权利要求1所述的抗PD-L1纳米抗体的VHH链、或如权利要求4所述的抗PD-L1纳米抗体；

(b)选自下组的偶联部分：可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、放射性核素、或酶。

12.如权利要求11所述的免疫偶联物，其特征在于，所述偶联物选自：荧光或发光标记物、放射性标记物、MRI或CT造影剂、或能够产生可检测产物的酶、放射性核素、生物毒素、细胞因子、抗体、抗体Fc片段、抗体scFv片段、病毒颗粒、脂质体、前药激活酶、化疗剂或任何形式的纳米颗粒。

13.如权利要求11所述的免疫偶联物，其特征在于，所述偶联物选自：金纳米颗粒/纳米棒或纳米磁粒。

14.权利要求4所述的抗PD-L1纳米抗体的用途，其特征在于，用于制备(a)用于检测PD-L1分子的试剂；(b)用于治疗肿瘤的药物，所述肿瘤为实体肿瘤。