[发明专利]小空间小体积加样管的分段加样方法

说明书

本发明公开了一种小空间小体积加样管的分段加样方法，采用管径0.5~4mm，容积≤100μL的小空间管，首先采用tip头或加样针吸取5~50μL溶液，移至小空间管底部或预加溶液的液面高度后，出液口缓慢上抬同时开始注液，注液时出液口沿一个方向运动，液面随动，保持注液口始终位于液面上，完成第一次注液；tip头或加样针继续吸液，移至第一次注液后的液面高度后开始注液，注液方法同上，完成第二次注液；重复第二步，完成所有溶液加样。本发明将常规盛装溶液和样本提纯物的标准管改为小空间加样管，分次进行加样，整个加样过程不会产生气泡、溅液等现象，保证了最终检测结果的准确性；同时本发明方法具有通用性，可以与多种加样装置配合使用。

技术领域

本发明涉及生物实验过程中反应溶液的加样方法，尤其是涉及一种小空间小体积加样管的分段加样方法。

背景技术

在生物实验中，将反应溶液添加到反应管中的过程称之为加样。加样时，微量生物试剂快速、精确的分配操作，是蛋白质结晶操作、新药研制、基因测序、生物化学实验等生物工程技术领域不可或缺的实验手段。特别是随着高通量筛选技术的发展和进步，实验中需要分配的试剂种类繁多，分配体积越来越小，采用手工操作已经不能满足微量、精确、快速的试剂分配要求。因此，研究自动化的微量生物试剂分配技术对提高分配精度、减少分配体积、提高分配速度，从而促进生物工程领域实验技术水平的提高，具有重要意义。

随着生物技术水平不断提高，单次实验中所操作的试剂体积不断减少，对样品处理的速度、精度等要求不断提高。与手工操作相比，采用自动化的试剂分配技术可以分配更小体积试剂，在等量样本情况下可以做更多的实验来选择最优条件；自动化试剂操作可以更精确分配样本试剂，提高实验成功率，避免了手工操作的枯燥性，可以将实验者从大量繁杂的实验中解脱出来，更好的进行实验规划和结果分析，提高效率。

虽然采用自动化的试剂分配技术优点多多，但是在具体操作时仍然会存在一些溅液等缺陷。

如：基因扩增技术即聚合酶链式反应（polymerase chain reaction简称PCR），可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力。由于该技术能检测单分子DNA或对每10万个细胞中仅含一个靶DNA分子的样品，因而该方法在分子生物学、微生物学、医学等领域得到广泛的应用和发展。

医院或检测机构的体外诊断设备（如全自动化学发光免疫分析系统、生化分析仪、核酸仪和尿仪等）在进行样品检测时需要采用基因扩增技术对样品进行前处理，这时需要用PCR管来存储溶液和样本提纯物，然后放置在PCR扩增仪上进行扩增反应。

目前对PCR管加样的方式主要分为两种：一种方法是采用直径小且能提高扩增效率的毛细管，溶液和样本提纯物采用手动分别添加进毛细管中，然后在离心机上进行离心处理（处理时加样管需要倾斜放置），故此种方式需要人工操作，不易实现自动化，且由于离心机安装空间大，导致整个设备体积增大；另一种是采用全自动加样平台，在加样位放置标准PCR管（直径5.35mm），使用加样泵和tip头配合悬空自动加样，但该种加样方法存在的缺陷较多：1、加样时管内容易产生气泡以及加样后溶液和提纯物不能充分混匀，其结果将直接影响后续的扩增反应，降低扩增效率，最终造成检测结果出现偏差甚至失败；2、悬空加样易出现溅液，溅液会造成PCR管周围被污染，增大了交叉污染的风险；3、由于标准PCR管直径较大，扩增时与加热件接触面小，温度升降效率低。

发明内容

本发明的目的在于提供一种小空间小体积加样管的分段加样方法。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的小空间小体积加样管的分段加样方法，加样管采用管径0.5~4mm的小空间管，具体加样步骤为：