[发明专利]利用淋巴瘤细胞株所构建的免疫缺陷裸鼠模型在审

专利信息
申请号: 201810555284.9 申请日: 2018-06-01
公开(公告)号: CN108835051A 公开(公告)日: 2018-11-20
发明(设计)人: 张明智;薛伟丽 申请(专利权)人: 郑州大学第一附属医院
主分类号: A01K67/027 分类号: A01K67/027
代理公司: 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 代理人: 时立新
地址: 450052 河*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 构建 淋巴瘤细胞株 传代 细胞株 免疫缺陷裸鼠 动物模型 成瘤率 淋巴瘤 裸鼠 培养液 申请 预处理 动物肿瘤模型 淋巴瘤细胞 固定作用 技术优势 接种对象 冷冻操作 肿瘤细胞 肿瘤组织 混悬液 基质胶 成瘤 皮下 制备 肿瘤 注射 复苏 配合 保证 表现
【权利要求书】:

1.一种利用淋巴瘤细胞株所构建的免疫缺陷裸鼠模型的构建方法,其特征在于,该方法利用NK细胞淋巴瘤细胞株、T细胞淋巴瘤细胞株或B细胞淋巴瘤细胞株构建而成,具体构建方法包括如下步骤:

(1)分别对接种对象及淋巴瘤细胞株进行预处理,

接种对象采用免疫缺陷型裸鼠,对免疫缺陷型裸鼠接种淋巴瘤细胞前,注射抑制免疫药物预处理;

对待接种的淋巴瘤细胞株,调整细胞浓度为:(5~20)×106/200μL;

(2)制备注射液,并注射裸鼠;

将步骤(1)中预处理后淋巴瘤细胞株培养液与基质胶混合均匀,以此作为注射液,制备完成后,皮下注射至裸鼠腋窝;

以体积比计,所述淋巴瘤细胞株培养液与基质胶的比例为1:0.8~1.5;

注射完成后,正常饲养裸鼠;

(3)肿瘤细胞传代,待步骤(2)中裸鼠体内肿瘤成长为成熟瘤后,无菌环境操作剥离瘤块,并剪成小块,在研磨器里研磨分散肿瘤细胞;

与步骤(2)相同,调整细胞浓度后与基质胶混合,注射裸鼠;

注射完成后,正常培养裸鼠,直至肿瘤长出,表明传代成功,此为第一代裸鼠,

重复此传代步骤,在传至不少于5代时,表明可稳定传代的淋巴瘤模型构建成功。

2.如权利要求1所述利用淋巴瘤细胞株所构建的免疫缺陷裸鼠模型的构建方法,其特征在于,步骤(1)中,所述免疫缺陷型裸鼠为Balb/c裸鼠,所述免疫药物为环磷酰胺。

3.如权利要求2所述利用淋巴瘤细胞株所构建的免疫缺陷裸鼠模型的构建方法,其特征在于,注射方式为:裸鼠腹腔连续注射环磷酰胺两天,注射量按100mg/kg计,注射液体积按0.2mL计,每天一次。

4.如权利要求3所述利用淋巴瘤细胞株所构建的免疫缺陷裸鼠模型的构建方法,其特征在于,步骤(2)中,淋巴瘤细胞株培养液与基质胶的比例为1:1。

5.如权利要求4所述利用淋巴瘤细胞株所构建的免疫缺陷裸鼠模型的构建方法,其特征在于,每只裸鼠注射300~500μL注射液。

6.如权利要求1所述利用淋巴瘤细胞株所构建的免疫缺陷裸鼠模型的构建方法,其特征在于,所述NK细胞淋巴瘤细胞株采用YT细胞株;

所述B细胞淋巴瘤细胞株采用DOHH2、LY8或Raji细胞株;

所述T细胞淋巴瘤细胞株采用Karpas细胞株。

7.利用权利要求1~6任一项所述利用淋巴瘤细胞株所构建的免疫缺陷裸鼠模型的构建方法所构建的免疫缺陷裸鼠模型。

8.权利要求6所述免疫缺陷裸鼠模型在医学中的应用,其特征在于,用于药物筛选或疗效评估。

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