[发明专利]一种用于规模化高密度培育绿藻的培养基及其培养方法

说明书

本发明公开了一种用于规模化高密度培育绿藻的培养基，包括基础培养基和扩培培养基，基础培养基包括无机盐有机物原液、微量元素原液、生长因子元素原液和增效缓冲剂原液；所述扩培培养基是将基础培养基添加至扩培水中搅拌均匀获得。本发明培养基中含有绿藻培育过程中所需活性成分，扩培速度快，绿藻繁育稳定，不容易老化死亡。本发明可实现高密度、低成本扩培绿藻，扩培后的绿藻具有活性，可大量繁育。

技术领域

本发明属于植物培育领域，涉及一种绿藻扩培技术，具体涉及一种用于规模化高密度培育绿藻的培养基及其培养方法。

背景技术

微藻是一类在陆地、海洋分布广泛，营养丰富、光合利用度高的自养植物，细胞代谢产生的多糖、蛋白质、色素等，使其在食品、医药、基因工程、液体燃料等领域具有很好的开发前景。小球藻、栅藻、卵囊藻、小桩藻是目前常见的绿藻中的养殖微藻种类，它们富含蛋白质、维生素、矿物质以及一些生物活性物质，在保健食品、生物饵料、污水处理、饲料添加、生物能源等方面都有广泛开发价值。但微藻培养仍然存在一些瓶颈：1、培养密度低，直接影响继续扩繁成功率及使用效果；2、培养过程中容易受到PH值变化影响，出现藻附壁，必需使用酸碱滴定进行中和，需要操作经验且非常麻烦；3、培养过程中非常容易污染，导致培养失败，无法实现长时间连续扩培；4、藻类培养依赖光照和水温等条件，需要专业技术，藻类发生器价格昂贵。在实验室以外的广大生产者难以自行大规模培养。

发明内容

本发明的目的是提供了一种集成化、自养兼异养、海淡水通用、无需培养经验，低成本、高密度地完成绿藻规模化扩培的培养基。

为了实现上述目的，本发明的技术方案为：提供一种用于规模化高密度培育绿藻的培养基，其中：包括基础培养基和扩培培养基，所述基础培养基包括无机盐有机物原液、微量元素原液、生长因子元素原液和增效缓冲剂原液；所述无机盐有机物原液为1000ml蒸馏水中含有0.15～0.45g硫酸铵、0.15～0.3g乙酸钠、0.15～0.3g碳酸氢钠、1.5～15g葡萄糖、0.08～0.3g丙酸钾；所述微量元素原液为100ml蒸馏水中含有20～40mg Na₂EDTA·2H₂O、15～30mg FeCl₃·6H₂O、0.1ml～0.2ml浓度为17.8g/L MnCl₂·4H₂O溶液、0.1～0.2g H₃BO₃、20～200mg海水晶；所述生长因子元素原液为100ml蒸馏水中含有8～20mg维生素B1、8～20mg维生素B12、0.2～0.5mg生物素、10～20mg烟酸；所述增效缓冲剂原液为200ml蒸馏水中含有4～10g磷酸氢二钾、1～3g磷酸二氢钾；所述扩培培养基是将基础培养基添加至扩培水中搅拌均匀获得。

进一步地，将无机盐有机物原液、微量元素原液、生长因子元素原液、增效缓冲剂原液均匀混合后获得基础培养基，于4～10℃密封保存。

进一步地，所述扩培培养基中包括以下体积百分数的成分：10～30％无机盐有机物原液、0.05～0.2％微量元素原液、0.1～0.2％生长因子元素原液、1～3％增效缓冲剂原液，其余为扩培水。

进一步地，用于规模化高密度培育绿藻的培养基，该培养基培养绿藻的方法，包括以下步骤：

(1)绿藻培育发生器消毒清洗干净；

(2)按上述配比，添加基础培养基，其余用扩培水补足，搅拌均匀，获得扩培培养基；

(3)绿藻与扩培培养基按照1:1～10倍体积比进行接种扩培；

(4)控制温度在22～28℃、光照强度在2000～6000lx、微流水转速为0.2～0.5转/s。

进一步地，所述扩培用水为自来水、消毒过滤的河水、井水或海水。