[发明专利]一种花生抗逆性基因及其应用有效
申请号: | 201810565222.6 | 申请日: | 2018-06-04 |
公开(公告)号: | CN108707614B | 公开(公告)日: | 2020-06-09 |
发明(设计)人: | 隋炯明;禹山林;王晶珊;乔利仙;杨庆利;衣艳君;张芳;汤松 | 申请(专利权)人: | 青岛农业大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20;C07K14/415 |
代理公司: | 山东三邦知识产权代理事务所(普通合伙) 37308 | 代理人: | 肖太升;高洋 |
地址: | 266109 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 花生 抗逆性 基因 及其 应用 | ||
本发明公开了一种花生抗逆性基因及其应用,属于生物技术领域。本发明的抗逆性基因序列如SEQ ID No.1或者SEQ ID No.1经取代、缺失或添加一个或几个碱基且编码相同功能蛋白的序列。构建该基因的植物表达载体和微生物表达载体,并将其分别转化到植物和微生物体内,可以增强植物和微生物的耐盐性。
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种花生抗逆性基因及其应用。
背景技术
生物在自然环境中经常要面对各种不利条件(如干旱、盐胁迫、低温等)胁迫;这些不利条件能够抑制生物的生长,甚至导致生物体死亡。随着环境的不断恶化,盐碱等逆境胁迫已经成为世界性的问题,培育具有多种抗逆性的生物新品种已成为广大育种家研究的主要目标之一。
目前,通常采用常规杂交方法选育生物新品种。当前发展迅速的基因工程技术为生物遗传改良提供了新的途径,利用在盐胁迫应答中起重要作用的基因进行遗传转化是获得耐盐新种质的重要手段。
发明内容
针对现有技术中存在的问题,本发明的目的在于提供一种花生抗逆性基因及其应用。
为了到达上述目的,本发明的技术方案为:
一种抗逆性基因,其序列如SEQ ID No.1或者SEQ ID No.1经取代、缺失或添加一个或几个碱基且编码相同功能蛋白的序列。
在上述方案的基础上,克隆该基因的引物序列为:
P1:5'GTCCAATACTATTATGGCTAGCCTC 3';
P2:5'TCAACAACCAACTGATTAAACCACC 3'。
扩增所述抗逆性基因任一片段的引物也属于本发明的保护范围。
在上述方案的基础上,其序列具有2个外显子,对应的碱基分别为第14-354,1083-1092位。
含有上述花生抗逆性基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
上述花生抗逆性基因编码的蛋白。
在上述方案的基础上,所述花生抗逆性基因编码蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNo.2或SEQ ID No.2经一个或几个氨基酸的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白。
上述花生抗逆性基因或其编码的蛋白在提高生物抗逆性中的应用。
在上述方案的基础上,所述的生物为植物和微生物;优选的,所述植物为拟南芥,所述微生物为大肠杆菌。
在上述方案的基础上,所述的抗逆性为耐盐性。
一种提高植物耐盐性的方法,将上述花生抗逆性基因构建到植物表达载体,导入植物细胞中,使其在植物中表达,获得高耐盐性植株。
一种提高微生物耐盐性的方法,将上述花生抗逆性基因构建到表达载体,导入微生物细胞中,使其在微生物细胞中表达,获得高耐盐性菌株。
本发明的有益效果:
1、本发明从花生中克隆到一条抗逆性基因,测序结果表明该基因有2个外显子,分别对应的碱基为14-354,1083-1092,将其命名为nsLTP1。
2、构建nsLTP1基因的植物表达载体,并转化拟南芥;结果表明:转入nsLTP1基因的拟南芥植株形态发育正常,转nsLTP1基因拟南芥苗至少可以抗100mM NaCl的胁迫;nsLTP1基因在拟南芥中表达可显著提高其耐盐性。
3、构建nsLTP1基因的原核表达载体,并转化大肠杆菌,重组菌可以抗7.5%NaCl的胁迫。
附图说明
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