[发明专利]一种多酶偶联生产海藻糖的方法及其应用

权利要求书

1.一种多酶偶联生产海藻糖的方法，其特征在于，所述方法为以大米淀粉为底物，经α-淀粉酶、普鲁兰酶、麦芽寡糖基海藻糖合成酶（MTSase）、麦芽寡糖基海藻糖水解酶（MTHase）、4-α糖基转移酶（TaAM）、环糊精葡萄糖基转移酶（CGTase）和糖化酶共同作用合成海藻糖；

所述环糊精葡萄糖基转移酶为α-CGTase或β-CGTase，α-CGTase或β-CGTase的添加量均为0.2~0.3U/mL；在pH为5.5、60℃下反应；所述4-α糖基转移酶来源于水生栖热菌（Thermusaquaticus），保藏于美国模式培养物研究所，保藏编号为ATCC 33923。

2.如权利要求1所述的一种多酶偶联生产海藻糖的方法，其特征在于，所述方法为将大米淀粉加入磷酸二氢钠-磷酸二氢钠缓冲液中配置一定浓度的大米淀粉溶液，将大米淀粉溶液煮沸，加入α-淀粉酶搅拌，将淀粉溶液液化成麦芽糊精溶液；将得到的麦芽糊精溶液降温至一定的温度后，添加普鲁兰酶、麦芽寡糖基海藻糖合成酶、麦芽寡糖基海藻糖水解酶、4-α糖基转移酶以及环糊精葡萄糖基转移酶进行酶催化反应，然后灭酶得到反应液；将所得的反应液调节到合适pH，加入糖化酶糖化。

3.如权利要求1或2所述的一种多酶偶联生产海藻糖的方法，其特征在于，所述普鲁兰酶的添加量为4~6U/g。

4.如权利要求1所述的一种多酶偶联生产海藻糖的方法，其特征在于，所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶的添加量为2~3U/mL。

5.如权利要求1所述的一种多酶偶联生产海藻糖的方法，其特征在于，所述麦芽寡糖基海藻糖水解酶的添加量为2~3U/mL。

6.如权利要求1所述的一种多酶偶联生产海藻糖的方法，其特征在于，所述4-α糖基转移酶的添加量为0.2~0.8U/mL。

7.如权利要求1所述的一种多酶偶联生产海藻糖的方法，其特征在于，所述糖化酶的添加量为4~6U/g。

8.权利要求1-7任一所述的一种多酶偶联生产海藻糖的方法在制备食品、药品以及化妆品方面的应用。