[发明专利]碳酸钙的制备方法在审
申请号: | 201810572720.3 | 申请日: | 2018-06-04 |
公开(公告)号: | CN108841870A | 公开(公告)日: | 2018-11-20 |
发明(设计)人: | 赵坤;宗奕吾;句颖;张文超 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12P3/00 | 分类号: | C12P3/00;C12R1/01 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 喻颖 |
地址: | 300354 天津市*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 碳酸钙 培养基 巴氏芽孢八叠球菌 菌液 制备 微生物 菌株接种 稀释菌液 振荡培养 模板法 微环境 烘干 稀释 尿素 去除 位点 取出 细菌 诱导 生长 应用 恢复 | ||
1.一种碳酸钙的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)配制细菌生长的培养基,灭菌后,加入过滤除菌的尿素,得到含尿素的培养基,将巴氏芽孢八叠球菌菌株接种入所述含尿素的培养基中,过夜振荡培养,得到巴氏芽孢八叠球菌菌液;
(2)配制钙盐溶液,过滤除菌后加入所述含尿素的培养基中,得到产碳酸钙培养基,取步骤(1)制备的所述巴氏芽孢八叠球菌菌液,去掉培养基后加入新鲜液体培养基混悬,将混悬后的菌液加入所述产碳酸钙培养基中,振荡培养,形成碳酸钙;取出形成碳酸钙后的菌液,彻底去除培养基,然后烘干制得微生物成因的碳酸钙;
(3)取步骤(1)制备的巴氏芽孢八叠球菌菌液,去掉培养基后加入所述含尿素的培养基混悬,使得细菌微环境pH恢复至中性;使用所述产碳酸钙培养基稀释菌液至OD600为0.01~0.1,取步骤(2)得到的所述微生物成因的碳酸钙加入稀释后的菌液中得到新的碳酸钙。
2.根据权利要求1所述的碳酸钙的制备方法,其特征在于,
步骤(1)中,所述细菌生长的培养基为营养肉汤培养基或酵母提取物培养基。
3.根据权利要求2所述的碳酸钙的制备方法,其特征在于,
所述营养肉汤培养基的组成为:按质量分数计,蛋白胨1%,牛肉膏1%,氯化钠0.5%,硫酸铵1%。
4.根据权利要求2所述的碳酸钙的制备方法,其特征在于,
所述酵母提取物培养基的组成为:按质量分数计,酵母粉2%,硫酸铵1%,三羟甲基氨基甲烷0.15%。
5.根据权利要求1所述的碳酸钙的制备方法,其特征在于,
所述含尿素的培养基中,尿素的质量分数为2%。
6.根据权利要求1所述的碳酸钙的制备方法,其特征在于,
步骤(1)中,巴氏芽孢八叠球菌菌株培养的温度为20~35℃,转速为150~250rpm。
7.根据权利要求1所述的碳酸钙的制备方法,其特征在于,
步骤(2)中,所述钙盐溶液包括氯化钙溶液。
8.根据权利要求1所述的碳酸钙的制备方法,其特征在于,
步骤(2)中,所述形成碳酸钙后的菌液彻底去除培养基的方法为:离心后去掉上清液,再使用超纯水重悬,重复至少三次。
9.根据权利要求1所述的碳酸钙的制备方法,其特征在于,
步骤(2)中,所述微生物成因的碳酸钙的烘干温度为50~100℃。
10.根据权利要求1所述的碳酸钙的制备方法,其特征在于,
步骤(2)中,所述产碳酸钙培养基中钙盐的浓度≥25mmol/L。
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