[发明专利]一种简便高效检测人血浆中文拉法辛及其活性代谢物O-去甲文拉法辛浓度的方法在审
| 申请号： | 201810574905.8 | 申请日： | 2018-06-06 |
| 公开（公告）号： | CN108982714A | 公开（公告）日： | 2018-12-11 |
| 发明（设计）人： | 毛叶萌;申书娟;张晨 | 申请（专利权）人： | 上海市精神卫生中心（上海市心理咨询培训中心） |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06;G01N30/02 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 200030 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 活性代谢物 去甲文拉法辛 人血浆 医药技术领域 高效检测 溶液配制 色谱条件 文拉法辛 血浆样品 血样处理 灵敏度 荧光法 专属性 中文 检测 优化 | ||
1.一种简便高效地检测人血浆中文拉法辛及其活性代谢物O-去甲文拉法辛浓度的方法，由以下步骤完成：(1)血浆样品的处理；(2)溶液配制；(3)色谱条件的选择。
2.根据权利要求1所述的简便高效地检测人血浆中文拉法辛及其活性代谢物O-去甲文拉法辛浓度的方法，其特征在于：所述血浆样品的处理为：取血浆样品500μL于5mL具塞离心管中，加入50μg/mL内标溶液30μL，于1500r/min涡旋3min，加乙醚3mL，1500r/min涡旋3min后，3000r/min离心15min进行萃取、抽提，取上层有机层于40℃氮气流下吹干，精密加入流动相100μL复溶，涡旋10s，得到血浆样品上样液，用高效液相荧光法进样10μL。
3.根据权利要求1所述的简便高效地检测人血浆中文拉法辛及其活性代谢物O-去甲文拉法辛浓度的方法，其特征在于：所述溶液配制：
0.05mol/L磷酸二氢钠溶液：称取NaH2PO4·H2O 3.44893g加水溶解并稀释至500mL，加三乙胺10μL，用磷酸溶液调pH至2.90；
盐酸文拉法辛标准储备液：精密称取盐酸文拉法辛2.33mg置10mL棕色容量瓶中，用50％甲醇-水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备溶液(206μg/mL)，4℃冰箱内保存备用；
O-去甲文拉法辛标准储备液：精密称取O-去甲文拉法辛2.12mg，置10mL棕色容量瓶中，用50％甲醇-水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备溶液(212μg/mL)，4℃冰箱内保存备用；
内标溶液：精密称取盐酸美西律2.33mg，置10mL棕色容量瓶中，用50％甲醇-水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液(193.6μg/mL)，4℃冰箱内保存备用，实验时用50％甲醇-水稀释为50μg/mL；
文拉法辛和O-去甲文拉法辛系列标准溶液：分别精密量取文拉法辛和O-去甲文拉法辛标准储备液适量，用50％甲醇-水稀释，制成浓度分别为25、18.725、12.5、5、2.5、1.25、0.5、0.25μg/mL的含文拉法辛和O-去甲文拉法辛系列标准溶液，4℃冰箱内保存备用。
4.根据权利要求1所述的简便高效地检测人血浆中文拉法辛及其活性代谢物O-去甲文拉法辛浓度的方法，其特征在于：其中高效液相色谱条件为：色谱柱Agilent Eclipse XDB-C18(5μm,4.6×150mm)，流动相为磷酸二氢钠(0.05mol/L)-乙腈(72:28)，流速0.05mL/min，柱温30℃，荧光激发波长276nm，发射波长598nm。
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