[发明专利]一种通过纯化学位移NMR谱鉴别茶叶产地差异的方法

权利要求书

1.一种通过纯化学位移NMR谱鉴别茶叶产地差异的方法，其特征在于，步骤如下：

1)制备不同产地的茶叶样品；

2)在核磁共振波谱仪上导入预先编译好的纯化学位移NMR谱脉冲序列；设置脉冲序列参数和采样参数，进行数据采集；对采集的数据进行相关的数据处理，得到所有样品的纯化学位移谱图；

3)通过相应的实验数据预处理获得纯化学位移谱图的分段积分数据；

4)将分段积分数据导入到统计分析软件中，通过主成分分析和正交偏最小二乘法分析判断两组组间和/或组内差异大小；

5)分析导致组间差异的化合物，判断不同产地的茶叶之间的化合物差异。

2.根据权利要求1所述的通过纯化学位移NMR谱鉴别茶叶产地差异的方法，其特征在于，步骤2)中，纯化学位移NMR谱脉冲序列包括PSYCHE序列，常规谱脉冲序列为tnnoesy序列；调用常规一维氢谱序列采集待测样品的一维氢谱，获得其信号峰分布区域及谱线线宽，为谱宽参数设置提供参考；再经过数据采集，得到待测样品的PSYCHE纯化学位移谱和常规tnnoesy谱。

3.根据权利要求2所述的通过纯化学位移NMR谱鉴别茶叶产地差异的方法，其特征在于，常规一维氢谱序列由一个非选择性射频脉冲和采样期构成，非选择性射频脉冲作用后进行信号采样。

4.根据权利要求2所述的通过纯化学位移NMR谱鉴别茶叶产地差异的方法，其特征在于，步骤3)中，对PSYCHE序列所采集到的FID信号进行数据处理，包括傅里叶变换、谱图相位和基线的调整、定标，去除干扰峰、分段积分和归一化后得到磁共振谱图的积分数据；对tnnoesy序列所采集到的FID信号进行傅里叶变换。

5.根据权利要求4所述的通过纯化学位移NMR谱鉴别茶叶产地差异的方法，其特征在于，步骤3)中，进行所述的数据处理时，对PSYCHE原始FID数据进行数据重组，将FID拼接组合，再通过傅里叶变换得到纯化学位移谱；然后进行谱图相位、基线的调整、去除溶剂峰和谱峰对齐的操作，再通过对谱图的分段积分获得积分数据，并对积分数据进行归一化；

tnnoesy的FID通过傅里叶变换得到常规tnnoesy谱；然后进行谱图相位、基线的调整、去除溶剂峰和谱峰对齐的操作，再通过对谱图的分段积分获得积分数据，并对积分数据进行归一化。

6.根据权利要求5所述的通过纯化学位移NMR谱鉴别茶叶产地差异的方法，其特征在于，步骤3)中，所得到的PSYCHE纯化学位移谱和常规tnnoesy谱分别用MestReNova软件进行数据预处理操作，包括手动相位矫正、多点基线矫正、定标、谱峰对齐和分段积分。

7.根据权利要求6所述的通过纯化学位移NMR谱鉴别茶叶产地差异的方法，其特征在于，去除PSYCHE纯化学位移谱和常规tnnoesy谱中的水峰部分，对剩余部分区域进行等间隔积分。

8.根据权利要求1所述的通过纯化学位移NMR谱鉴别茶叶产地差异的方法，其特征在于，步骤4)中，利用统计分析软件SIMCA-P+来完成主成分分析和正交偏最小二乘法分析，获取不同产地的茶叶之间的聚类特征以及引起差异代谢物。

9.根据权利要求1所述的通过纯化学位移NMR谱鉴别茶叶产地差异的方法，其特征在于，步骤1)中，茶叶的溶液样品制备步骤为：将茶叶研磨成粉末，进行水浴加热；取上层清液放入离心机进行离心，再取上层清夜加入缓冲液，混合后移入核磁管密封。