[发明专利]用于检测鸽副伤寒沙门氏菌的核酸、试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一组用于检测鸽副伤寒沙门氏菌的核酸，其特征在于，包括鸽副伤寒沙门氏菌上游引物和鸽副伤寒沙门氏菌下游引物，所述鸽副伤寒沙门氏菌上游引物的核苷酸序列如SEQID NO .1所示，所述鸽副伤寒沙门氏菌下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO .2所示。

2. 根据权利要求1所述的核酸，其特征在于，还包括用于检测沙门氏菌的内参核酸，包括内参上游引物和内参下游引物，所述内参上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO .3所示，所述内参下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO .4所示。

3. 根据权利要求1 所述的核酸，其特征在于，还包括鸽副伤寒沙门氏菌阳性对照，所述鸽副伤寒沙门氏菌阳性对照含如SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列。

4.含有权利要求1-3中任一项所述核酸的检测试剂盒。

5. 根据权利要求4所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括2×Premix，所述2×Premix包括PCR反应缓冲液、Mg²⁺、dNTP和Taq 酶。

6.一种用于非疾病诊断目的的检测鸽副伤寒沙门氏菌的方法，其特征在于，其包括以下步骤：

S1、提取待检样品基因组DNA；

S2、对提取的所述基因组DNA采用根据权利要求4或5所述的检测试剂盒进行PCR扩增，获得扩增产物；

S3、用琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，判断样品是否含有鸽副伤寒沙门氏菌。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，在步骤S3中，所述判断的方法为：

如果电泳结果在463bp位置出现扩增条带，则说明样品中含有沙门氏菌；

如果没有出现相应的463bp扩增条带，则样品中不含有沙门氏菌；

如果电泳结果在613bp位置和463bp位置均出现扩增条带，则说明样品中含有鸽副伤寒沙门氏菌；

如果没有出现相应的613bp扩增条带，则样品中不含有鸽副伤寒沙门氏菌。

8. 根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述PCR扩增所采用20μL反应体系，包括：2×Premix 10μL，10μmol/L的上游引物、下游引物各0 .5μL，模板溶液1.5μL，最后灭菌去离子水补足至20μL。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，所述PCR扩增所采用的扩增程序为：先95℃预变性5min，之后开始扩增循环，每个循环的程序为：94℃变性30s，52℃退火30s，72℃延伸40s，循环共30个；循环结束后，72℃延伸7min，降温至16℃，结束。

10.权利要求1-3中任一项所述的核酸或权利要求4或5所述的检测试剂盒在用于制备检测鸽副伤寒沙门氏菌试剂中的应用。