[发明专利]焦磷酸测序HNF-1α基因3′UTR突变位点的引物、试剂盒及检测方法在审

专利信息
申请号: 201810576396.2 申请日: 2018-06-06
公开(公告)号: CN108676858A 公开(公告)日: 2018-10-19
发明(设计)人: 方晨;吴建武;黄健;郭鹤鸣;黄韵;胡吉 申请(专利权)人: 苏州大学附属第二医院
主分类号: C12Q1/6858 分类号: C12Q1/6858;C12N15/11
代理公司: 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 代理人: 王锋
地址: 215000 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 突变位点 焦磷酸测序 测序引物 分析引物 扩增引物 试剂盒 检测 引物 第二引物 第一引物 分型
【权利要求书】:

1.一种焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的扩增引物对,其特征在于包括:

第一引物,其序列如SEQ ID NO.1所示;

第二引物,其序列如SEQ ID NO.2所示。

2.一种焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的测序引物,其特征在于,所述测序引物的序列如SEQ ID NO.3所示。

3.一种焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的分析引物,其特征在于,所述分析引物的序列如SEQ ID NO.4所示。

4.一种焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的试剂盒,其特征在于包括:

权利要求1所述的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的扩增引物对;

权利要求2所述的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的测序引物;

以及,权利要求3所述的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的分析引物。

5.如权利要求4所述的试剂盒,其特征在于还包括PCR扩增检测的常规组件。

6.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于:所述PCR扩增检测的常规组件包括Taq DNA聚合酶、PCR反应缓冲液和超纯水,所述PCR反应缓冲液包括脱氧核苷三磷酸混合液。

7.权利要求4-6中任一项所述的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的试剂盒于检测HNF-1α基因3′UTR突变位点中的用途。

8.一种焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的方法,其特征在于包括:

提供待检测的DNA样本;

利用权利要求4-6中任一项所述的试剂盒所包含的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的扩增引物对对所述DNA样本进行PCR扩增;

利用权利要求4-6中任一项所述的试剂盒所包含的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的测序引物和分析引物对PCR扩增产物进行检测,从而将HNF-1α基因3′UTR c.2116G>T突变位点进行分型。

9.根据权利要求8的方法,其特征在于,所述PCR扩增的条件包括:

PCR循环,包括:

首先进行35个热循环,每个循环包括:依次在98℃下变性保温10s,66℃退火保温30s,72℃延伸保温1min;

其后,在72℃下延伸保温1min,其中,焦磷酸的上样量为15μL;

和/或,所述待检测的DNA样本来自于糖尿病患者的外周血。

10.一种包含权利要求4-6中任一项所述的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的试剂盒的产品,所述产品应用于焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的方法,所述方法包括:

提供待检测的DNA样本;

利用所述试剂盒所包含的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的扩增引物对对所述DNA样本进行PCR扩增;

利用所述试剂盒所包含的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的测序引物和分析引物对PCR扩增产物进行检测,从而将HNF-1α基因3′UTRc.2116G>T突变位点进行分型。

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