[发明专利]焦磷酸测序HNF-1α基因3′UTR突变位点的引物、试剂盒及检测方法在审
申请号: | 201810576396.2 | 申请日: | 2018-06-06 |
公开(公告)号: | CN108676858A | 公开(公告)日: | 2018-10-19 |
发明(设计)人: | 方晨;吴建武;黄健;郭鹤鸣;黄韵;胡吉 | 申请(专利权)人: | 苏州大学附属第二医院 |
主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人: | 王锋 |
地址: | 215000 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 突变位点 焦磷酸测序 测序引物 分析引物 扩增引物 试剂盒 检测 引物 第二引物 第一引物 分型 | ||
1.一种焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的扩增引物对,其特征在于包括:
第一引物,其序列如SEQ ID NO.1所示;
第二引物,其序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的测序引物,其特征在于,所述测序引物的序列如SEQ ID NO.3所示。
3.一种焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的分析引物,其特征在于,所述分析引物的序列如SEQ ID NO.4所示。
4.一种焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的试剂盒,其特征在于包括:
权利要求1所述的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的扩增引物对;
权利要求2所述的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的测序引物;
以及,权利要求3所述的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的分析引物。
5.如权利要求4所述的试剂盒,其特征在于还包括PCR扩增检测的常规组件。
6.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于:所述PCR扩增检测的常规组件包括Taq DNA聚合酶、PCR反应缓冲液和超纯水,所述PCR反应缓冲液包括脱氧核苷三磷酸混合液。
7.权利要求4-6中任一项所述的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的试剂盒于检测HNF-1α基因3′UTR突变位点中的用途。
8.一种焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的方法,其特征在于包括:
提供待检测的DNA样本;
利用权利要求4-6中任一项所述的试剂盒所包含的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的扩增引物对对所述DNA样本进行PCR扩增;
利用权利要求4-6中任一项所述的试剂盒所包含的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的测序引物和分析引物对PCR扩增产物进行检测,从而将HNF-1α基因3′UTR c.2116G>T突变位点进行分型。
9.根据权利要求8的方法,其特征在于,所述PCR扩增的条件包括:
PCR循环,包括:
首先进行35个热循环,每个循环包括:依次在98℃下变性保温10s,66℃退火保温30s,72℃延伸保温1min;
其后,在72℃下延伸保温1min,其中,焦磷酸的上样量为15μL;
和/或,所述待检测的DNA样本来自于糖尿病患者的外周血。
10.一种包含权利要求4-6中任一项所述的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的试剂盒的产品,所述产品应用于焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的方法,所述方法包括:
提供待检测的DNA样本;
利用所述试剂盒所包含的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的扩增引物对对所述DNA样本进行PCR扩增;
利用所述试剂盒所包含的焦磷酸测序HNF‐1α基因3′UTR突变位点的测序引物和分析引物对PCR扩增产物进行检测,从而将HNF-1α基因3′UTRc.2116G>T突变位点进行分型。
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