[发明专利]肺癌早期DNA甲基化标志物检测试纸盒和检测方法

权利要求书

1.一种肺癌早期DNA甲基化标志物检测试纸盒，其特征在于，所述肺癌早期DNA甲基化标志物检测试纸盒包括F2RL3基因的DNA甲基化检测试剂、SHOX2基因的DNA甲基化检测试剂、RASSF1A基因的DNA甲基化检测试剂、ANKRD18B基因的DNA甲基化检测试剂和MPDZ基因的DNA甲基化检测试剂，所述肺癌早期DNA甲基化标志物检测试纸盒还包括PCR反应液、聚合酶、阳性质控品、阴性对照以及DNA修饰液。

2.如权利要求1所述的肺癌早期DNA甲基化标志物检测试纸盒，其特征在于，所述PCR反应液包括0.2uM的F2RL3基因的扩增引物对、0.06uM的F2RL3基因的检测探针，0.2uM的RASSF1A基因的扩增引物对、0.06uM的RASSF1A基因的检测探针，0.2uM的SHOX2基因的扩增引物对、0.06uM的SHOX2基因的检测探针，0.2uM的ANKRD18B基因的扩增引物对、0.06uM的ANKRD18B基因的检测探针，0.2uM的MPDZ基因的扩增引物对、0.06uM的MPDZ基因的检测探针，以及0.67uM的β-actin基因的扩增引物对和0.02uM的β-actin基因的检测探针；3.5mM的MgCl2；0.25mM的dNTP。

3.如权利要求1所述的肺癌早期DNA甲基化标志物检测试纸盒，其特征在于，所述聚合酶为200U的Taqman聚合酶。

4.如权利要求1所述的肺癌早期DNA甲基化标志物检测试纸盒，其特征在于，所述阳性质控品为500个细胞/μL，为非小细胞肺癌HCC827细胞系计数后提取的DNA。

5.如权利要求1所述的肺癌早期DNA甲基化标志物检测试纸盒，其特征在于，所述阴性对照为灭菌水。

6.如权利要求1所述的肺癌早期DNA甲基化标志物检测试纸盒，其特征在于，所述DNA修饰液为3M亚硫酸氢钠，pH＝5.0。

7.一种肺癌早期DNA甲基化标志物检测方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

提取待测样品；

利用权利要求1至6任一项所述的肺癌早期DNA甲基化标志物检测试纸盒对所述待测样品进行检测，获得F2RL3基因的DNA甲基化程度、SHOX2基因的DNA甲基化程度、RASSF1A基因的DNA甲基化程度、ANKRD18B基因的DNA甲基化程度和MPDZ基因的DNA甲基化程度；

根据待检的五个基因的DNA甲基化程度，确定待检对象是否为肺癌高危或肺癌患者。

8.如权利要求7所述的肺癌早期DNA甲基化标志物检测方法，其特征在于，所述待测样品来源于含有细胞的样本提取的核酸或含有来源于细胞的核酸的样本。

9.如权利要求7所述的肺癌早期DNA甲基化标志物检测方法，其特征在于，所述待测样品是指待检测的核酸样本，其中含有一种核酸或多种核酸，需要检测其中是否存在目标核酸。

10.如权利要求9所述的肺癌早期DNA甲基化标志物检测方法，其特征在于，所述探针是指一种具有已知核苷酸序列的单链核酸，该单链核酸具有与目标核酸互补的核苷酸序列结构，该单链核酸与目标核酸形成双链。