[发明专利]一种检测OCA2基因多态性的试剂盒

说明书

本发明公开了一种检测OCA2基因多态性的试剂盒，试剂盒包括检测OCA2基因上的rs1800414号位点的特异性引物及特异性荧光探针、内参基因β‑actin检测位点的特异性引物及特异性荧光探针、阳性质控品、阴性质控品、Taq DNA聚合酶和PCR反应缓冲液等。本发明试剂盒可用检测OCA2基因多态性，针对OCA2特异性SNP位点设计检测引物和探针，灵敏性高、特异性强；检测对象来源于口腔拭子，整个检测过程为无创检测；为OCA2基因多态性检测提供新的试剂盒，方便应用。

技术领域

本发明涉及一种检测OCA2基因多态性的试剂盒。

背景技术

色素沉着是人体皮肤由于种种原因而致皮肤呈现不同颜色、不同范围及不同深浅的色素 变化。色素沉着的变化是由影响产生的黑素体数量、黑色素的类型、黑素体的大小和形状的 生物化学差异引起的。皮肤色素沉着的成因，通常受阳光、紫外线辐射或化妆品、药物及其 它物质刺激后，形成黑色的皮肤色素沉积而成。皮肤色素沉着按等级可分为I级为轻度光老 化，没有明显可见的素色沉积，无需使用遮瑕霜遮盖色斑；II级为中度光老化，此时色素 沉积更多、更明显，出现棕色色斑、肤色不均、雀斑等；III级为高度光老化。此时色素沉 积问题加重，出现黄褐斑、太田痣等，往往很难去除；IV级为重度光老化，出现严重的皱 纹、色斑等。

长期以来人们认识到，个体之间的色素差异是由遗传性状引起的。研究表明，皮肤黑色 素沉着与OCA2(Oculocutaneous Albinism II)基因的His615Arg(rs1800414)相关。携 带G等位基因变异的人相比A祖先等位基因纯合子的人，具有较强的抗黑色素能力。OCA2基 因位于15号染色体，由24个外显子和23个内含子构成。该基因编码黑素体跨膜蛋白，参与小分子转运，尤其是络氨酸的转运，而络氨酸是黑色素合成的前体。该基因参与黑色素沉积，控制着皮肤黑色素的变化。

目前进行基因多态性检测的方法有数十种。金标准法为基因测序法。基因测序法是目前 应用最广泛、较准确的一种方法，但是该方法需要昂贵的仪器设备和专业的人员进行操作， 费时费力，在临床上很难进行推广。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术中检测OCA2基因多态性的方法操作复杂的缺 陷，提供一种检测OCA2基因多态性的试剂盒。

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：

一种检测OCA2基因多态性的试剂盒，包括检测OCA2基因上的rs1800414号位点的特异 性引物及特异性荧光探针、内参基因β-actin检测位点的特异性引物及特异性荧光探针、 阳性质控品、阴性质控品、Taq DNA聚合酶和PCR反应缓冲液。

所述检测OCA2基因上的rs1800414号位点的特异性引物及特异性荧光探针的序列为：

正向引物：5’-AGTCAGAAGGTTGTGCAGAGTAA-3’

反向引物：5’-GCCAGGGACAAACGAATTGAG-3’

野生型探针：5’-FAM-TGTGGTTTCTCTCTTACAGCATAG-BHQ2-3’

突变型探针：5’-HEX-TGTGGTTTCTCTCTTACAGCGTAG-BHQ2-3’。

进一步的，所述内参基因β-actin检测位点的特异性引物及特异性荧光探针序列为：

正向引物：5’-GATGGAGGAGGTTTAGTAA-3’

反向引物：5’-AATAAAACCTACTCCTCCCT-3’

特异性探针：5’-VIC-CCACCACCCAACACACAATAACAAACA-BHQ2-3。