[发明专利]一种复合纳米钻石药物及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种复合纳米钻石药物及其制备方法和应用。所述药物是以纳米钻石(Nanodiamond，ND)为载体，在柠檬酸钠存在下，先后将米托蒽醌(Mitoxantrone，MTO)和阿霉素(Doxorubicin，DOX)以物理吸附的方式负载于ND表面得到复合纳米药物(ND/MTO/DOX)。通过JC‑1法检测细胞线粒体膜电位的变化情况，发现该复合纳米药物造成线粒体膜电位下降的程度最大；通过MTT法证实，MTO与DOX的协同效应，在很大程度上提高了对癌细胞的杀伤力，且该复合纳米药物具有缓释药物特性；共聚焦结果表明ND/MTO/DOX复合纳米药物主要定位于溶酶体中，且随时间延长，药物未迁移到细胞核，我们推测该体系可能造成溶酶体通透性增加，使大量水解酶释放，从而促进细胞凋亡。该复合纳米钻石药物可在制备抗肿瘤药物中应用。

技术领域

本发明涉及纳米药物，特别涉及一种同时负载两种抗癌药物的纳米钻石多重药物，具体是一种纳米钻石/米托蒽醌/阿霉素复合纳米钻石药物及其制备方法和应用。

背景技术

当今社会食品安全和环境污染问题日益严峻，癌症发病率逐年上升，已成为最主要的人类“杀手”之一。目前癌症治疗手段主要有：手术、放射与化学药物治疗三种常规方法。其中因化学疗法操作简单，被广泛用于临床，例如阿霉素、甲氨蝶呤与米托蒽醌等。在某种程度上，化学疗法是有效的，但其在正常组织的非特异性生物分布和对健康快速分裂细胞的影响，导致病人产生严重的毒副作用。此外，化疗药物存在溶解度差、在体内降解快速且血液循环时间短等诸多缺陷，故急需设计高效且低毒的药物靶向输送系统治疗癌症。

随着人们对肿瘤微环境的认识和近年来纳米技术的迅速发展，纳米材料已然成为科学家们的“研究宠儿”。在众多纳米材料中，由于纳米钻石(ND)生物相容性好、表面易修饰且比表面积大等诸多优点，已被广泛地用于靶向递送药物和基因。以蒽环类为主的化疗药物，如阿霉素，表柔比星，柔红霉素，可以通过静电吸附、π-π相互作用、范德华力和氢键等方式物理吸附于ND表面。纵然纳米钻石载药体系在很多方面尤于游离的药，但肿瘤仍难消除，易复发，这归因于该纳米材料体系仅仅携带一种化疗药物。因此，亟需制备可以同时携带多种抗癌药物分子且可以协同治疗肿瘤的纳米钻石新体系。

米托蒽醌(Mitoxantrone，MTO)是一种人工合成蒽环类抗肿瘤药物，是一种临床上广泛应用的抗癌药，在乳腺癌、急性白血病和淋巴瘤中表现出较高的疗效，可通过物理吸附负载到ND上。基于阿霉素和米托蒽醌的结构相似，本文以羧酸化的纳米钻石，在柠檬酸钠作用下物理吸附化疗药物米托蒽醌与阿霉素制备得到多重纳米药物，并研究了该种药物的抗肿瘤活性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种同时负载两种化疗药物的纳米钻石药物及其制备方法，以及该药物在抗肿瘤中的应用。

本发明提供的一种同时负载两种化疗药物(米托蒽醌与阿霉素)的纳米钻石药物的制备方法，包括如下步骤：

按照质量比7-10：1.5-3：1称取ND、MTO与DOX，先将ND超声分散于柠檬酸钠溶液中，30min后，加入MTO，室温搅拌0.5-1.5h，离心，用蒸馏水洗涤直至上清液为无色，收集上清液，记录液体体积，得到ND/MTO纳米药物；再将ND/MTO纳米药物超声分散于柠檬酸钠溶液中，30min后，加入DOX，室温搅拌0.5-1.5h后，离心，用蒸馏水洗涤直至上清液为无色，收集上清液，记录液体体积，所得ND/MTO/DOX复合纳米药物置于真空冷冻干燥机干燥，备用。

ND、MTO、DOX质量比优选为8.3：2：1。

柠檬酸钠溶液的浓度为1.0M。

室温搅拌时间优选1h。

上述制备的复合纳米钻石药物可以在协同抗肿瘤中应用。