[发明专利]用于结直肠癌诊断、检测或筛查的引物和探针组有效

专利信息
申请号: 201810587088.X 申请日: 2018-06-06
公开(公告)号: CN108796080B 公开(公告)日: 2022-06-07
发明(设计)人: 赵国栋 申请(专利权)人: 苏州唯善生物科技有限公司
主分类号: C12Q1/6886 分类号: C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11
代理公司: 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 代理人: 刘妍妍
地址: 215300 江苏省苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 用于 直肠癌 诊断 检测 引物 探针
【权利要求书】:

1.用于结直肠癌诊断、检测或筛查的引物和探针组的扩增体系,其特征在于,包括SEPT9的扩增引物、Blokcer引物和探针,以及SDC2的扩增引物、Blocker引物和探针;SEPT9的正向引物为SEQ ID NO:20,SEPT9的反向引物为SEQ ID NO:38,SEPT9的Blocker引物为SEQ ID NO:53,SEPT9的探针为SEQ ID NO:79;SDC2的正向引物为SEQ ID NO:99,SDC2的反向引物为SEQ ID NO:127,SDC2的Blocker引物为SEQ ID NO:144,SDC2的探针为SEQ ID NO:167;还含有一组内参基因引物探针组,其中所述内参基因为ACTB;所述ACTB的正向引物为SEQ ID NO:175,反向引物为SEQ ID NO:176,ACTB的探针选自SEQ ID NO:177;

检测对象为从生物样本中经过基因组DNA提取、纯化后再使用亚硫酸氢盐转化得到的DNA样本;所述的亚硫酸氢盐为亚硫酸氢铵,亚硫酸氢盐的浓度为8M;亚硫酸氢盐转化过程的反应条件为:DNA加入到8M亚硫酸氢盐溶液中,70℃加热60分钟。

2.如权利要求1所述的用于结直肠癌诊断、检测或筛查的引物和探针组的扩增体系,其特征在于,SEPT9、SDC2、ACTB甲基化的检测同时在一个荧光定量PCR反应中完成或单独针对一个位点进行荧光定量PCR反应。

3.如权利要求1所述的用于结直肠癌诊断、检测或筛查的引物和探针组的扩增体系,其特征在于,SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:144的3’端分别使用磷酸基和C3修饰。

4.如权利要求1所述的用于结直肠癌诊断、检测或筛查的引物和探针组的扩增体系,其特征在于,扩增体系具体组分为:

5.权利要求1~4任一项所述的扩增体系在制备结直肠癌及其癌前病变的早期筛查、检测或诊断的试剂的应用。

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