[发明专利]用于结直肠癌诊断、检测或筛查的引物和探针组有效
申请号: | 201810587088.X | 申请日: | 2018-06-06 |
公开(公告)号: | CN108796080B | 公开(公告)日: | 2022-06-07 |
发明(设计)人: | 赵国栋 | 申请(专利权)人: | 苏州唯善生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 刘妍妍 |
地址: | 215300 江苏省苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 直肠癌 诊断 检测 引物 探针 | ||
1.用于结直肠癌诊断、检测或筛查的引物和探针组的扩增体系,其特征在于,包括SEPT9的扩增引物、Blokcer引物和探针,以及SDC2的扩增引物、Blocker引物和探针;SEPT9的正向引物为SEQ ID NO:20,SEPT9的反向引物为SEQ ID NO:38,SEPT9的Blocker引物为SEQ ID NO:53,SEPT9的探针为SEQ ID NO:79;SDC2的正向引物为SEQ ID NO:99,SDC2的反向引物为SEQ ID NO:127,SDC2的Blocker引物为SEQ ID NO:144,SDC2的探针为SEQ ID NO:167;还含有一组内参基因引物探针组,其中所述内参基因为ACTB;所述ACTB的正向引物为SEQ ID NO:175,反向引物为SEQ ID NO:176,ACTB的探针选自SEQ ID NO:177;
检测对象为从生物样本中经过基因组DNA提取、纯化后再使用亚硫酸氢盐转化得到的DNA样本;所述的亚硫酸氢盐为亚硫酸氢铵,亚硫酸氢盐的浓度为8M;亚硫酸氢盐转化过程的反应条件为:DNA加入到8M亚硫酸氢盐溶液中,70℃加热60分钟。
2.如权利要求1所述的用于结直肠癌诊断、检测或筛查的引物和探针组的扩增体系,其特征在于,SEPT9、SDC2、ACTB甲基化的检测同时在一个荧光定量PCR反应中完成或单独针对一个位点进行荧光定量PCR反应。
3.如权利要求1所述的用于结直肠癌诊断、检测或筛查的引物和探针组的扩增体系,其特征在于,SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:144的3’端分别使用磷酸基和C3修饰。
4.如权利要求1所述的用于结直肠癌诊断、检测或筛查的引物和探针组的扩增体系,其特征在于,扩增体系具体组分为:
5.权利要求1~4任一项所述的扩增体系在制备结直肠癌及其癌前病变的早期筛查、检测或诊断的试剂的应用。
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