[发明专利]一种L-氨基酸的生产方法有效
申请号: | 201810587713.0 | 申请日: | 2018-06-08 |
公开(公告)号: | CN108753858B | 公开(公告)日: | 2020-10-23 |
发明(设计)人: | 杨立荣;蒙丽钧;张雨晴;周海胜;刘亚运;尹新坚;徐刚;吴坚平 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12P13/04 | 分类号: | C12P13/04 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 胡红娟 |
地址: | 310013 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 氨基酸 生产 方法 | ||
1.一种L-氨基酸的生产方法,其特征在于,包括:以1,ω-二胺或其盐为氨基供体,在底物α-酮酸或其盐存在的条件下,利用转氨酶催化1,ω-二胺与底物发生转氨反应,得到L-氨基酸;
所述1,ω-二胺为1,4-丁二胺、1,5-戊二胺或1,6-己二胺;
所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.4-6所示时,所述α-酮酸为2-酮丁酸;
所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1-3所示时,所述α-酮酸为2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸、2-酮丁酸、2-氧代戊酸、4-甲基-2-氧代戊酸、3-甲基-2-氧代戊酸、3-甲基-2-氧代丁酸、苯丙酮酸或2-氧代-4-苯基丁酸。
2.如权利要求1所述的生产方法,其特征在于,所述1,ω-二胺为1,4-丁二胺;所述α-酮酸为2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸,所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1-3所示。
3.如权利要求1所述的生产方法,其特征在于,所述转氨酶为离体酶、固定化酶或者细胞体内表达的酶。
4.如权利要求3所述的生产方法,其特征在于,所述细胞为表达转氨酶的工程菌,所述工程菌的宿主细胞为E. coli BL21(DE3),所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
5.如权利要求1所述的生产方法,其特征在于,所述氨基供体与底物的摩尔比为0.8-4:1。
6.如权利要求1所述的生产方法,其特征在于,反应体系中存在辅酶,所述辅酶为磷酸吡哆醛或磷酸吡哆胺;所述辅酶的浓度为0.01-2.5 mM。
7.如权利要求1所述的生产方法,其特征在于,所述转氨反应的温度为20-80℃,时间为3-48 h。
8.如权利要求1所述的生产方法,其特征在于,控制转氨反应的pH值为6-11。
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