[发明专利]一种L-氨基酸的生产方法有效

专利信息
申请号: 201810587713.0 申请日: 2018-06-08
公开(公告)号: CN108753858B 公开(公告)日: 2020-10-23
发明(设计)人: 杨立荣;蒙丽钧;张雨晴;周海胜;刘亚运;尹新坚;徐刚;吴坚平 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12P13/04 分类号: C12P13/04
代理公司: 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 代理人: 胡红娟
地址: 310013 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 氨基酸 生产 方法
【权利要求书】:

1.一种L-氨基酸的生产方法,其特征在于,包括:以1,ω-二胺或其盐为氨基供体,在底物α-酮酸或其盐存在的条件下,利用转氨酶催化1,ω-二胺与底物发生转氨反应,得到L-氨基酸;

所述1,ω-二胺为1,4-丁二胺、1,5-戊二胺或1,6-己二胺;

所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.4-6所示时,所述α-酮酸为2-酮丁酸;

所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1-3所示时,所述α-酮酸为2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸、2-酮丁酸、2-氧代戊酸、4-甲基-2-氧代戊酸、3-甲基-2-氧代戊酸、3-甲基-2-氧代丁酸、苯丙酮酸或2-氧代-4-苯基丁酸。

2.如权利要求1所述的生产方法,其特征在于,所述1,ω-二胺为1,4-丁二胺;所述α-酮酸为2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸,所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1-3所示。

3.如权利要求1所述的生产方法,其特征在于,所述转氨酶为离体酶、固定化酶或者细胞体内表达的酶。

4.如权利要求3所述的生产方法,其特征在于,所述细胞为表达转氨酶的工程菌,所述工程菌的宿主细胞为E. coli BL21(DE3),所述转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

5.如权利要求1所述的生产方法,其特征在于,所述氨基供体与底物的摩尔比为0.8-4:1。

6.如权利要求1所述的生产方法,其特征在于,反应体系中存在辅酶,所述辅酶为磷酸吡哆醛或磷酸吡哆胺;所述辅酶的浓度为0.01-2.5 mM。

7.如权利要求1所述的生产方法,其特征在于,所述转氨反应的温度为20-80℃,时间为3-48 h。

8.如权利要求1所述的生产方法,其特征在于,控制转氨反应的pH值为6-11。

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