[发明专利]一种固化土壤的芽孢杆菌菌剂及其使用方法

权利要求书

1.一种固化土壤的芽孢杆菌菌剂，其特征在于该菌剂通过以下步骤制备：

a.将巴氏芽孢杆菌(Bacillus pasteurii)冻干粉放入NH₄-YE培养基中，在30℃下活化培养24h后得到菌种(1)；

b.将菌种(1)接种至装有液体培养基(2)的500mL摇瓶中进行适应性培养，装液量为400mL，得到菌种(3)，其中，液体培养基(2)由10g/L麸皮、15g/L玉米粉、25g/L豆粕、5g/L氯化钠、20g/L尿素构成，pH为7.3，麸皮、玉米粉、豆粕均过筛处理，筛孔尺寸200目，液体培养基(2)使用前在121℃下灭菌20min；

c.将菌种(3)接入装有液体培养基(2)的种子罐中进行扩大培养，得到种子液(4)，种子罐体积100L～1000L，装液量60％～80％；

d.以2％～5％的接种量将种子液(4)接入装有液体培养基(2)的发酵罐中进行发酵培养，发酵罐体积10～100m³，装液量60％～80％，得到发酵液(5)。

e.对发酵液(5)进行喷雾干燥，进风温度100℃，出风温度80℃，得到菌粉(6)；

f.将菌粉(6)与轻质碳酸钙按照质量比5∶1混合均匀，得到固化土壤的芽孢杆菌菌剂。

2.根据权利要求1所述的固化土壤的芽孢杆菌菌剂，其特征在于步骤b中菌种(1)停止适应性培养的条件为摇瓶中的巴氏芽孢杆菌脲酶活性大于10mmol/min。

3.根据权利要求1所述的固化土壤的芽孢杆菌菌剂，其特征在于步骤d中发酵条件为：发酵温度30℃，通气量150～200L/h，搅拌速度为130～180r/min，停止发酵的条件为：发酵罐中巴氏芽孢杆菌的活菌数量≥1×10⁹cfu/mL。

4.根据权利要求1所述的固化土壤的芽孢杆菌菌剂的使用方法，其特征在于使用方法为：通过搅拌方式将固化土壤的芽孢杆菌菌剂与待加固土壤按5～10∶100的体积比混合均匀，静置12h使细菌吸附于土颗粒上，然后往待加固土壤中注入2～8遍由0.50～1.00mol/L尿素和氯化钙等摩尔比混合而成的胶结溶液，静置24h，利用巴氏芽孢杆菌新陈代谢活动诱导出具有胶凝作用的碳酸钙结晶完成土壤加固。