[发明专利]一种单端孢霉烯类化合物及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种单端孢霉烯类化合物及其制备方法和用途，特点是该单端孢霉烯类化合物的结构式如Ⅰ所示，其制备方法步骤包括将保藏号为CGMCC No.14121的镰刀菌通过微生物发酵培养来获取单端孢霉烯类化合物的发酵物，通过纱布过滤使菌丝体与发酵液分离；然后将菌丝体加入到甲醇中超声破碎，再用乙酸乙酯等体积萃取3次，将萃取物用旋转蒸发仪蒸干得到菌体浸膏；将发酵液用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并收集乙酸乙酯相，将乙酸乙酯相用旋转蒸发仪蒸干得到菌液浸膏，合并菌体浸膏和菌液浸膏得到总粗浸膏；最后将总粗浸膏用乙腈溶解后，用半制备反相高效液相色谱进行分离纯化得到，优点是对水产致病菌哈维弧菌具有抑制作用。

技术领域

本发明涉及一种单端孢霉烯类化合物，尤其是涉及一种单端孢霉烯类化合物及其制备方法和用途。

背景技术

已报道的单端孢霉烯类化合物具有多方面的生物活性，包括抗肿瘤、抗HIV、抗菌、抗疟、抗白血病、抑制蛋白质的合成、抑制DNA和RNA的合成、免疫抑制、以及用做生物除草剂和杀虫剂等生物活性。本发明人研究得知，海洋真菌液体发酵产物经乙酸乙酯提取，提取物有较好的抗菌活性，于是对其活性成分进行了研究。目前尚未见该化合物结构及抗哈维弧菌活性的报道，因此市场上也尚未见有与此相关的药物。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种对水产致病菌哈维弧菌具有一定的抑制作用的单端孢霉烯类化合物及其制备方法和用途。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种单端孢霉烯类化合物，该化合物的结构式如下Ι所示：

(Ι)。

上述单端孢霉烯类化合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)发酵生产

将保藏编号为CGMCC No. 14121的镰刀菌(Fusarium sp.)菌种划线复活，接种到PDB固体培养基，28℃培养箱中活化3天，用接种针从斜面中挑取一个菌落接种到PDB液体培养基中，于28℃，在转速为180rpm的摇床上震荡培养3天得到种子液，然后将种子液以体积比10%的接种量接到PDB液体培养基中，于28℃，在转速为180rpm的摇床上震荡培养12天，获得菌株发酵物，将菌株发酵物通过纱布过滤分离获得菌丝体与发酵液；

(2)浸膏获取

将步骤（1）得到的菌丝体加入到甲醇中超声破碎，再用乙酸乙酯等体积萃取3次，将萃取物用旋转蒸发仪蒸干得到菌体浸膏；将步骤（1）得到的发酵液用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并收集乙酸乙酯相，将乙酸乙酯相用旋转蒸发仪蒸干得到菌液浸膏；将菌体浸膏和菌液浸膏合并得到总粗浸膏；

(3)化合物Ι的分离精制

将步骤（2）得到的总粗浸膏用乙腈溶解后，用半制备反相高效液相色谱进行分离纯化得到单端孢霉烯类化合物，其结构如下所示：

(Ι)。

所述的PDB固体培养基的配制方法如下：将26g马铃薯、35g海盐和20g琼脂溶于1L蒸馏水中；所述的PDB液体培养基的配制方法如下：将26g马铃薯和35g海盐溶于1L蒸馏水中，调pH至7.6-7.8。

所述的半制备反相高效液相色谱的洗脱液为乙腈与水按体积65:35的比例混合而成。

上述单端孢霉烯类化合物的用途，所述的单端孢霉烯类化合物在用于制备水产致病菌哈维弧菌抑制剂方面的用途。

与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明一种单端孢霉烯类化合物及其制备方法和用途，通过海洋真菌发酵培养来获取单端孢霉烯类化合物的发酵物，然后将发酵产物用乙酸乙酯提取，得粗浸膏，将该提取物经反相半制备高效液相色谱分离纯化得到，该单端孢霉烯类化合物具有抗水产致病菌哈维弧菌的作用。