[发明专利]一种B群脑膜炎球菌fHBP B亚家族单克隆抗体及其制备方法

说明书

本发明涉及一种B群脑膜炎球菌fHBP B亚家族抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株，保藏编号为CGMCC No.15782。本发明所述B群脑膜炎球菌fHBP B亚家族抗原特异性单克隆抗体，上述的细胞株制备得到。

技术领域

本发明涉及一种单克隆抗体的制备，特别涉及一种针对B群脑膜炎球菌fHBP B亚家族抗原特异性单克隆抗体及其制备方法，所述B群脑膜炎球菌fHBP B亚家族抗原特异性单克隆抗体对fHBP B亚家族抗原有特异性免疫反应，而对B群脑膜炎球菌fHBP A亚家族抗原无交叉反应性，所述单克隆抗体可用于以fHBP A、fHBP B抗原为疫苗组份的B群脑膜炎球菌疫苗中fHBP抗原的定量和鉴定，以及质量评价。亦可将该单克隆抗体制备成药物用于治疗由B群脑膜炎球菌感染引起的脓毒败血症等相关病症。

背景技术

B群脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitides group B，)，俗称B群脑膜炎球菌，能够引起流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)和败血症，该疾病具有较高的发病率和病死率。为侵袭性脑脊髓膜炎的常见血清群的一种，目前，B群脑膜炎奈瑟菌已经成为主要的流行菌株，其与A、C群脑膜炎球菌引起的病例占90％以上。

区别于其他脑膜炎球菌，B群脑膜炎球菌的荚膜多糖中由于含有线性多聚唾液酸与人神经细胞粘附因子的N-乙酰神经氨酸聚合物结构类似，在人体内不具备免疫原性，且有诱发自生免疫疾病的危险，所以B群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白成为疫苗的候选抗原。其中的外膜脂蛋白2086，即LP2086，因其能够结合人H因子，下调补体激活途径的旁路途径，而使细菌逃避机体的识别与攻击而生存，现称为H因子结合蛋白(factor H binding protein,fHBP)。

fHBP是一种几乎表达于所有脑膜炎奈瑟菌表面的特异性脂蛋白，相对分子质量29KD左右，是脑膜炎奈瑟菌重要的毒力因子和疫苗抗原，为已上市或研发中的B群脑膜炎球菌疫苗中的重要组成成份。

fHBP分为两个亚家族，A亚家族和B亚家族，即fHBP A与fHBP B。基于聚类比对分析，fHBP蛋白系统发生树表明，B亚家族约占分离株的70％，A亚家族约占30％。fHBP的氨基酸序列较保守，同一亚族内91.6％～100％氨基酸相同，不同亚族最低为62.8％。

本发明的fHBP B亚家族单克隆抗体能够对B亚家族fHBP产生特异性抗原抗体反应，在疫苗研发和生产中，用于fHBP蛋白的定性、定量、比活等质量测定及评价。以本发明的fHBP B亚家族特异性单克隆抗体制备成治疗性药物，可用于治疗由B群脑膜炎球菌引起的疾病

发明内容

本发明的目的在于提供一种B群脑膜炎球菌fHBP B亚家族单克隆抗体杂交瘤细胞株，保藏编号为CGMCC No.15782。

本发明所述杂交瘤细胞已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(China General Microbiological Culture Collection Center,CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101，保藏编号CGMCCNo.15782，保藏日期2018年5月16日，分类命名为：B群脑膜炎球菌fHBP B亚家族单克隆抗体杂交瘤细胞株。

本发明提供了所述杂交瘤细胞株在检测B群脑膜炎球菌疫苗中fHBP B亚家族抗原成份的应用。

本发明提供了所述杂交瘤细胞株在B群脑膜炎球菌疫苗中fHBP B亚家族抗原成份的鉴别应用。

本发明所述杂交瘤细胞株在含有fHBP B亚家族抗原B群脑膜炎球菌疫苗制备中的应用。

本发明的另一个目的在于提供一种B群脑膜炎球菌fHBP B亚家族抗原特异性单克隆抗体。

本发明所述的单克隆抗体，由上述的杂交瘤细胞株制备得到。

本发明所述的单克隆抗体的制备方法，步骤如下：