[发明专利]低浓度可同化有机碳的测定方法

说明书

本发明是一种低浓度可同化有机碳测定方法。所述方法先通过0μg乙酸碳/L以及75μg乙酸碳/L的标准溶液作为空白对照及产率对照，接种荧光假单胞菌P17及螺旋菌NOX，通过测定细菌浓度，确定两种细菌所对应的产率系数，再根据两种细菌在待测水样中的浓度，计算得到待测水样中的AOC浓度。在水样AOC浓度较低的情况下，本发明方法测得的AOC值更加接近于水样真实值，能够更准确的反映水样的生物稳定性状况，为生物稳定饮用水的制备工艺提供更准确的设计参数。

技术领域

本发明属于水质分析技术领域，涉及一种可同化有机碳的测定方法，具体涉及一种饮用水中低浓度可同化有机碳(AOC)的测定方法。

背景技术

可同化有机碳(AOC)是指能被细菌利用并合成细菌细胞的有机物，是饮用水中异养细菌再生长的主要碳源。AOC作为评价饮用水中微生物再生长潜力的一个重要指标，是有机物中最容易被微生物利用，可直接同化为微生物体的部分。Van der Kooij首次提出利用微生物手段对AOC进行检测的方法，国内外研究人员均对其进行了不同程度的改进与优化。但AOC作为一个新兴的水质指标，其标准测定方法尚未建立，不同研究人员在测定过程中对水样的接种方式不一，且产率对照组标准乙酸碳溶液浓度的选取缺乏相关的理论依据，大多直接采用Van der Kooij所选的100μg乙酸碳/L，导致所测水样的AOC偏差较大，偏差约为60％～80％。在AOC测定过程中，所用磷酸盐缓冲溶液以及矿物盐溶液等的制备及使用方法无统一规定，导致不同研究人员测定结果之间的可比性较差。

发明内容

针对现有AOC测定方法用于低浓度AOC测定时产生的误差较大的不足，在现有AOC测定方法基础上，本发明提供一种低浓度AOC的测定方法，该方法能够较准确地测得的水样的AOC，能够更好的用于评价饮用水的生物稳定性，提供更为准确的生物稳定饮用水制备工艺参数。

本发明的技术方案为：

低浓度AOC的测定方法，包括如下步骤：

步骤1：制作标准曲线，具体步骤如下：

(1)乙酸碳标准溶液的配制：利用磷酸盐溶液配制0μg乙酸碳/L以及75μg乙酸碳/L的标准溶液作为空白对照及产率对照，将配制好的标准溶液高压灭菌；

(2)接种测试菌种：取灭菌后的标准乙酸碳溶液，分别接种荧光假单胞菌P17及螺旋菌NOX，接种浓度为10⁴CFU/mL，将接种后的标准溶液在25℃培养箱中培养，其中P17培养3天，NOX培养4天；

(3)细菌浓度测定：对步骤(2)培养后的标准溶液中的细菌浓度进行测定，采用平板计数法，平板培养基为LLA培养基，培养温度为25℃，其中P17培养3天，NOX培养4天；

(4)计算产率系数：利用不同浓度的标准乙酸碳溶液中细菌浓度与乙酸碳浓度，按以下公式计算两种细菌所对应的产率系数：

步骤2：测定水样AOC浓度，具体步骤如下：

(1)待测水样的预处理：首先用硫代硫酸钠溶液中和水样中的余氯，后用微孔滤膜过滤水样，以去除颗粒物对测定结果的干扰，同时取磷酸盐缓冲溶液作为空白对照样以及取75ug乙酸碳/L的乙酸钠标准溶液作为产率对照样，对空白对照样及产率对照样同样加入相应体积的硫代硫酸钠溶液并用微孔滤膜过滤；

(2)接种测试菌种：在预处理后的待测水样中先接种荧光假单胞菌P17，接种浓度为10⁴CFU/mL，将接种后的水样在25℃培养箱中培养3天后涂板计数，后将水样巴氏灭菌并接种螺旋菌NOX，25℃培养箱中培养4天后涂板计数，接种体积按下式计算：