[发明专利]一种黄芪多糖脂质体的制备方法

说明书

本发明公开了一种黄芪多糖脂质体的制备方法，其包括如下工艺步骤：1)将大豆卵磷脂和胆固醇按原料质量比为8:1共同溶于氯仿溶液中；2)将步骤1)所述混合液进行减压旋转蒸发处理，待形成一层薄膜后加入乙醚薄膜溶解；3)加入原料质量为胆固醇添加量一半的含有黄芪多糖的磷酸盐缓冲溶液，超声处理，再进行减压旋转蒸发至乙醚全部挥发，得黄芪多糖脂质体。本发明采用逆向蒸发法制备黄芪多糖脂质体，并通过调整其原料配比及工艺参数，使所得黄芪多糖脂质体悬液的包封率高达90％以上，且所制备得的黄芪多糖脂质体具有优异的稳定性和细胞穿透性，从而对提高生物利用率和降低黄芪多糖使用剂量具有重要的临床意义，进而有效推动黄芪多糖新制剂的研发。

技术领域

本发明涉及化工医药领域，特别涉及一种脂质体的制备方法。

背景技术

黄芪多糖是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根经提取、浓缩、纯化而成的水溶性杂多糖。其呈淡黄色，粉末细腻，均匀无杂质，具引湿性。黄芪多糖由己糖醛酸、葡萄糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等组成，可作为免疫促进剂或调节剂，同时具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗应激、抗氧化等作用。然而传统的黄氏多糖制剂存在稳定性差、生物利用度低、易被降解及对细胞穿透力弱等缺点，其包封率普遍低于50％，且通过传统的给药方式进行给药的疗效并不好。现有技术中多通过对黄芪多糖改性以提高其生物活性从而更好地发挥其药效，然而这些改性是针对黄芪多糖结构的，如硫酸化、羧甲基化、乙酰基化等，其工艺复杂，可控性差。因此如何提高黄芪多糖的生物利用度、稳定性和治疗效果、降低使用剂量，对其黄芪多糖新制剂的研发具有重大意义。

发明内容

本发明的目的在于针对上述现有技术的不足，提供一种黄芪多糖脂质体的制备方法。

本发明所采取的技术方案是：一种黄芪多糖脂质体的制备方法，其包括如下工艺步骤：

1)将大豆卵磷脂和胆固醇按原料质量比为7:1～9:1共同溶于氯仿溶液中，得混合液；

2)将步骤1)所述混合液置于转速为50～65r/min、温度为37℃的条件下进行减压旋转蒸发处理，待形成一层薄膜后加入乙醚薄膜溶解；

3)加入原料质量为胆固醇添加量一半的含有黄芪多糖的磷酸盐缓冲溶液，超声混匀处理80～100s，再置于转速为50～65r/min、温度为37℃的条件下进行减压旋转蒸发至乙醚全部挥发，置于4℃保存，得黄芪多糖脂质体。

具体地，本发明中大豆卵磷脂和胆固醇的原料质量比对其最终黄芪多糖脂质体悬液的包封率有着重要影响，大豆卵磷脂和胆固醇的原料质量比多大或多小均会使得其包封率下降。而本发明中的胆固醇和含有黄芪多糖的磷酸盐缓冲溶液的原料质量比对其黄芪多糖脂质体的形成效率有着重要影响，当所述磷酸盐缓冲溶液的添加量为胆固醇的一半时，可使脂质体快速形成。

作为上述方案的进一步改进，所述磷酸盐缓冲溶液的浓度为4.5～6mg/mL，其有利于提高黄芪多糖脂质体的包封率。

作为上述方案的进一步改进，所述磷酸盐缓冲溶液的pH为7.4，其有利于提高体系的稳定性。

作为上述方案的进一步改进，所述含有黄芪多糖的磷酸盐缓冲溶液中的黄芪多糖的纯度≥80％，其有利于实现较高的生物利用率。

本发明采用如下方法对各项试样的包封率进行测定：

A、校准曲线的制备：以葡聚糖标准品和蒽酮-浓硫酸显色法建立黄芪多糖校准曲线，并采用蒽酮-浓硫酸显色法测定样品中各项指标的吸光度。根据建立的校准曲线回归方程换算出所需各项指标的质量，从而计算出各测试样的包封率。