[发明专利]基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)

权利要求书

1.基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)，其特征在于，包括以下步骤：

将20μL 800 U/L的酸性磷酸酶溶液、不同浓度的As(V)溶液和50μL HEPES 缓冲溶液混合，用超纯水稀释到总体积为100μL，在37℃水浴中反应90 min，再加入150μL的量子点@铽离子-单磷酸鸟嘌呤核苷酸纳米复合物，漩涡混匀后，在37℃水浴中反应40 min，采用荧光分光光度计测量溶液在激发波长为280 nm 时的荧光光谱，根据不同浓度的 As(V)与对应的Tb与量子点的荧光信号强度之间的比值的线性关系来实现对As(V)的高灵敏和选择性检测，或还可结合氧化处理检测实际样品中无机砷总量，或在紫外灯照射下，观察溶液颜色的变化来实现对As(V)的快速可视化分析；

其中，所述量子点@铽离子-单磷酸鸟嘌呤核苷酸纳米复合物溶液的制备方法包括以下步骤：

将10μL8μM的量子点溶液、100μL10 mM 的单磷酸鸟嘌呤核苷酸溶液与800μL HEPES 缓冲溶液混合，再向溶液中加入100μL 10 mM的Tb³⁺溶液，并立刻剧烈震荡使溶液混合均匀，将得到黄色浑浊溶液在10000 rpm转速下离心10min，收集黄色沉淀，用超纯水清洗沉淀三次，将得到的黄色沉淀产物分散在1 mL HEPES 缓冲溶液中，制成量子点@铽离子-单磷酸鸟嘌呤核苷酸纳米复合物溶液。

2. 根据权利要求1 所述基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)，其特征在于，所述HEPES 缓冲溶液的浓度为50 mM，pH为7.4，含25 mM的Mg²⁺。

3. 根据权利要求1 所述基于酸性磷酸酶活性抑制原理的比率荧光法检测As(V)，其特征在于，所述HEPES缓冲溶液的浓度为25 mM，pH为7.4。