[发明专利]一种检测胃癌肿瘤标志物夹心型免疫传感器的制备方法及应用

说明书

本发明涉及一种检测胃癌肿瘤标志物夹心型免疫传感器的制备方法及应用，属于新型纳米功能材料、免疫分析和生物传感器领域。其制备三维多孔二硫化钼负载金纳米粒子h‑MoS₂/Au NPs作为基底材料修饰裸玻碳电极，提高肿瘤标志物捕获抗体的固载量，并有效加速电极表面的电子传递速率；制备正八面体氧化亚铜/二氧化钛核壳结构负载介孔铂铜纳米粒子Cu₂O@TiO₂/PtCu复合纳米材料固载检测抗体，并利用其对双氧水H₂O₂的优异电化学催化性能制得了简单、快速、灵敏的夹心型电化学免疫传感器，用于胃癌相关肿瘤标志物的检测。

技术领域

本发明属于纳米功能材料、免疫分析以及生物传感技术领域，具体涉及一种检测胃癌肿瘤标志物夹心型免疫传感器的制备方法及应用。

背景技术

胃癌已是我国常见的恶性肿瘤之一，中国每年新增胃癌病例为40.5万人，占世界新增病例的42.5%，发病率居消化系统肿瘤之首；专家介绍到：胃癌是可防可治的，只要早期发现、早期治疗，治愈率可达90%；因此早期诊断对胃癌的预防和治疗具有重要的临床意义。CA72-4是目前诊断胃癌的最佳肿瘤标志物之一，对胃癌具有较高的特异性，其敏感性可达28~80%，对胃癌的早期诊断具有重要意义。目前，对于肿瘤标志物的检测方法很多，如放射免疫分析法、免疫放射分析法、化学免疫发光分析法、时间分辨荧光免疫分析法等，但多数检测方法繁琐，操作复杂，费用昂贵，检出限高，因此，建立一种快速、简便、灵敏的检测方法有重要意义。

夹心型电化学免疫传感器将高特异性的免疫分析技术和高灵敏的电化学分析技术相结合，具有灵敏度高、制备简单、检测快速、成本低等优点，在临床检验、环境监测、食品安全控制、生物监测等领域都有重要的应用价值。而构建电化学免疫传感器的关键有两点：其一是采用简单、快速、有效的方法将抗原抗体等生物分子固定在电极表面；其二是开发传感器的信号放大技术。

三维多孔二硫化钼/金纳米粒子复合材料(h-MoS₂/Au NPs)具有大的比表面积和良好的生物相容性，可以显著提高捕获抗体Ab₁的固载量，并有效加速电极界面的电子传递速度；新颖复合纳米材料Cu₂O@TiO₂/PtCu利用各组分协同作用对H₂O₂的良好电催化作用，实现多重信号放大，实现对胃癌肿瘤标志物的灵敏检测。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备简单、灵敏度高、特异性强、检测快速的可用于胃癌相关肿瘤标志物检测的夹心型电化学免疫传感器的制备方法，所制备的传感器可用于胃癌肿瘤标志物的快速、灵敏检测等应用。基于此目的，本发明先采用一锅法制备出多孔二硫化钼/金纳米粒子复合材料h-MoS₂/Au NPs对裸玻碳电极进行修饰，有效提高了电极的有效比表面积，增大了抗体的负载量；并且极大增强了电极界面的电子响应速度和对测试底液的电催化信号强度等性能；然后利用Cu₂O@TiO₂/PtCu固定胃癌肿瘤标志物检测抗体；进而通过Cu₂O@TiO₂/PtCu对H₂O₂的良好电催化作用以及良好的生物相容性用于固载检测抗体，构建夹心型免疫传感器，实现对胃癌肿瘤标志物的灵敏检测。

本发明的技术方案如下：

1. 一种检测胃癌肿瘤标志物夹心型免疫传感器的制备方法，其特征在于，制备步骤如下：

(1) 制备h-MoS₂/Au NPs