[发明专利]米蛋白肽-钙螯合物的制备方法

权利要求书

1.一种米蛋白肽-钙螯合物的制备方法，其特征在于：是以米蛋白为原料，经碱性蛋白酶水解后获得米蛋白肽水解液，米蛋白肽水解液中的多肽冷冻干燥后，与钙螯合反应得到米蛋白肽-钙螯合物。

2.根据权利要求1所述的米蛋白肽-钙螯合物的制备方法，其特征在于：还包括对米蛋白肽水解液进行超滤分级，筛选出3-5ku肽段进行后续螯合反应。

3.根据权利要求2所述的米蛋白肽-钙螯合物的制备方法，其特征在于：所述的螯合反应的条件为多肽与钙质量比6:1～8:1、pH7～9、温度40～60℃、反应时间60～120min。

4.根据权利要求3所述的米蛋白肽-钙螯合物的制备方法，其特征在于：所述的螯合反应的条件为多肽与钙质量比5.61：1、pH8.09、温度43.40℃、反应时间93.26min。

5.根据权利要求4所述的米蛋白肽-钙螯合物的制备方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：取5g米蛋白溶于112ml的去离子水中，先与90℃水浴锅中预处理10分钟，待温度降至63.94℃后用1mol/L氢氧化钠调pH至8.52，加入0.37ml碱性蛋白酶后，用1mol/L的氢氧化钠维持pH为8.52，水解4个小时后沸水浴灭酶，冷却至室温，用1mol/L HCL调pH值7后于5000r/min离心10min，取上清液，将米蛋白肽水解液在0.25MPa压力下超滤，依次用透过分子质量为5，3ku的超滤膜超滤，得到分子质量为3～5ku的米蛋白肽滤出液；将分级后的肽段透过液冻干后备用，将5.61g米蛋白肽溶于112.2ml去离子水中配成底物浓度为5％的肽液，加入1g CaCl₂,，涡旋混匀，调至pH8.09，后进行螯合反应，反应温度为43.4℃，反应时间为93.26min，取出后冷却至室温，用三倍无水乙醇沉淀，待沉淀析出，10000g离心15分钟，收集沉淀，用无水乙醇洗涤至上清液加入钙指示剂不变色；烘箱先调温度到100℃烘1h，然后降到30℃烘螯合物至干，得到螯合率高的米蛋白肽-钙螯合物。

6.根据权利要求1所述的米蛋白肽-钙螯合物的制备方法，其特征在于：所述的米蛋白肽-钙螯合物在促进钙吸收中的应用。