[发明专利]用于同时检测奶牛8种遗传缺陷基因位点的引物组合、试剂盒及其应用在审
申请号: | 201810617238.7 | 申请日: | 2018-06-15 |
公开(公告)号: | CN108456729A | 公开(公告)日: | 2018-08-28 |
发明(设计)人: | 张毅;肖炜;俞英;魏丽;杨湛澄;王雅春;刘林;王丽丽 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学;北京市畜牧总站;北京博奥晶典生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人: | 周际;曹成果 |
地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 引物 遗传缺陷 引物组合 基因位点 奶牛 检测 试剂盒 高灵敏度 低成本 应用 | ||
1.一种用于同时检测奶牛8种遗传缺陷基因位点的引物组合,其特征在于,所述引物组合包括8组,其中,第一组引物如序列表SEQ ID No.1-3所示,用于检测奶牛脊柱畸形综合征所对应的遗传缺陷基因位点;第二组引物如序列表SEQ ID No.4-6所示,用于检测奶牛白细胞粘附缺陷所对应的遗传缺陷基因位点;第三组引物如序列表SEQ ID No.7-9所示,用于检测奶牛缺陷单倍型HH1所对应的遗传缺陷基因位点;第四组引物如序列表SEQ ID No.10-12所示,用于检测奶牛缺陷单倍型HH3所对应的遗传缺陷基因位点;第五组引物如序列表SEQID No.13-15所示,用于检测奶牛缺陷单倍型HH4所对应的遗传缺陷基因位点;第六组引物如序列表SEQ ID No.16-18所示,用于检测奶牛缺陷单倍型HH5所对应的遗传缺陷基因位点;第七组引物如序列表SEQ ID No.19-21所示,用于检测奶牛缺陷单倍型HCD所对应的遗传缺陷基因位点;第八组引物如序列表SEQ ID No.22-24所示,用于检测奶牛短脊柱畸形综合征所对应的遗传缺陷基因位点。
2.如权利要求1所述的引物组合,其特征在于,每组引物包括两条上游引物和一条下游引物。
3.如权利要求1或2所述的引物组合,其特征在于,每组引物中的三条引物在核苷酸序列表中按次序排列的第一条引物和第二条引物为上游引物,第三条引物为下游引物。
4.如权利要求3所述的引物组合,其特征在于,所述上游引物携带有HEX或FAM荧光基团。
5.如权利要求4所述的引物组合,其特征在于,第一条上游引物携带HEX荧光基团,第二条上游引物携带FAM荧光基团。
6.如权利要求3所述的引物组合,其特征在于,所述下游引物为通用下游引物。
7.一种用于同时检测8种奶牛遗传缺陷基因位点的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含权利要求1所述的8组引物。
8.如权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包含模板DNA、PCR预混液和双蒸水,其中,所述PCR预混液中包含dNTPs、Mg2+、DNA聚合酶和反应缓冲液。
9.如权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,每组引物与模板DNA、PCR预混液以及双蒸水组成一个PCR反应体系,每个PCR反应体系的体积为1uL,优选的,每组引物中的三条引物的体积比为1:1:1。
10.权利要求1所述的引物组合或权利要求7所述的试剂盒在制备用于检测奶牛遗传缺陷疾病试剂中的应用。
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