[发明专利]一种多糖及在CIK细胞培养方面的应用

说明书

本发明公开了一种多糖及在CIK细胞培养方面的应用，制备方法包括：步骤S1、紫穗槐叶用95％乙醇浸泡，过滤收集滤渣；滤渣用水提取，过滤收集滤液；滤液加入95％乙醇，静置，离心收集沉淀；沉淀用水复溶，冷冻干燥得到紫穗槐叶粗多糖；紫穗槐叶粗多糖配制成1％多糖溶液，缓慢滴加无水乙醇至乙醇浓度为30％，静置离心，沉淀复溶冻干得F30组分；上清液中缓慢滴加无水乙醇至乙醇浓度达40％，静置离心，沉淀复溶冻干得F40组分；上清液中缓慢滴加无水乙醇至乙醇浓度达50％，静置离心，沉淀复溶冻干得F50组分；上清液中缓慢滴加无水乙醇至乙醇浓度达60％，静置离心，沉淀复溶冻干得F60组分。

技术领域

本发明属于化学领域，涉及一种多糖及在CIK细胞培养方面的应用。

背景技术

紫穗槐Amorpha fruticosa为豆科Leguminosae多年生落叶灌木，别名棉槐、椒条、棉条、穗花槐。花，清热、凉血、止血；叶，微苦、凉，具有祛湿消肿功效，主治痈肿、湿疹、烧烫伤。原产美国东北部和东南部，系多年生优良绿肥，蜜源植物，耐瘠，耐水湿和轻度盐碱土，又能固氮。现我国东北、华北、西北及山东、安徽、江苏、河南、湖北、广西、四川等省区均有栽培。枝叶作绿肥、家畜饲料；茎皮可提取栲胶，枝条编制篓筐；果实含芳香油，种子含油率10％，可作油漆、甘油和润滑油之原料。栽植于河岸、河堤、沙地、山坡及铁路沿线，有护堤防沙、防风固沙的作用。

近年来，对紫穗槐的化学成分和药理活性研究的逐步深入，发现很多活性成分，在抗肿瘤、抗病毒、保肝、杀虫等方面显示出潜在的药用价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种多糖及在CIK细胞培养方面的应用。

本发明通过下面的技术方案实现：

技术方案一：

一种用于促进CIK细胞增殖的多糖，重均分子量为322.3KDa。

上述多糖的制备方法，包括如下步骤：

步骤S1、紫穗槐叶粗多糖的制备

将紫穗槐叶剪碎，用体积分数95％乙醇溶液浸泡24h，料液比1:40，过滤收集滤渣；滤渣用水于85℃提取3次，每次2h，料液比1:25，合并提取液，过滤收集滤液；滤液真空浓缩至原有体积1/5，加入5倍体积95％乙醇，静置24h，离心收集沉淀；沉淀用水复溶，冷冻干燥得到紫穗槐叶粗多糖；

步骤S2、紫穗槐叶分级多糖F30的制备

每10g紫穗槐叶粗多糖溶解于1L的去离子水中形成浓度为1％(w/v，g/mL)的多糖溶液，然后向溶液中缓慢滴加无水乙醇，并不断搅拌使溶液至乙醇浓度为30％(v/v，mL/mL)，静置24h，离心20min(4℃、10000×g)，沉淀复溶冻干得F30组分；

F30组分即为所述多糖。

上述多糖在CIK细胞培养扩增方面的应用。

技术方案二：

一种用于促进CIK细胞增殖的多糖，重均分子量为258.1KDa。

上述多糖的制备方法，包括如下步骤：

步骤S1、紫穗槐叶粗多糖的制备

将紫穗槐叶剪碎，用体积分数95％乙醇溶液浸泡24h，料液比1:40，过滤收集滤渣；滤渣用水于85℃提取3次，每次2h，料液比1:25，合并提取液，过滤收集滤液；滤液真空浓缩至原有体积1/5，加入5倍体积95％乙醇，静置24h，离心收集沉淀；沉淀用水复溶，冷冻干燥得到紫穗槐叶粗多糖；

步骤S2、紫穗槐叶分级多糖F40的制备