[发明专利]一种早期诊断喉鳞状细胞癌的唾液基因检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种早期诊断喉鳞状细胞癌的唾液基因检测试剂盒。唾液中hsa‑miR‑544a、hsa‑miR‑4726和hsa‑miR‑154‑3p联合诊断LSCC的准确率为96.88％(93/96)；唾液中hsa‑miR‑544a、hsa‑miR‑4726和hsa‑miR‑655‑5p联合诊断LSCC的准确率为92.71％(89/96)；唾液中hsa‑miR‑544a、hsa‑miR‑4726和hsa‑miR‑552‑3p联合诊断LSCC的准确率为95.83％(92/96)，诊断准确率高。

技术领域

本发明属于基因检测领域，涉及一种早期诊断喉鳞状细胞癌的唾液基因检测试剂盒。

背景技术

头颈癌是全世界第六大常见肿瘤类型，其中喉癌是头颈部最常见的恶性肿瘤之一，而喉 鳞状细胞癌(laryngealsquamouscellcarcinoma,LSCC)是喉癌中最常见的组织学类型(约 85％～90％)。随着医学的发展，喉癌的治疗方式也越来越多，但喉癌的死亡率并没有明显改 善，其主要原因是目前缺乏简单适用的筛查方法。

微小RNA(microRNA,miRNA)是指长度约22个核苷酸的内源性微小非编码RNA，是多种生物学过程的有效调节子。对miRNA的研究表明：miRNA参与了人体细胞内多种重要 的调节过程。其中miRNAs与肿瘤发生、发展的关系已成为目前研究的热点。近年来，有关miRNA在LSCC诊断及转移等方面的研究层出不穷，已有多项研究发现LSCC患者的组织和 血液(包括血清和血浆)中有特别的miRNA表达谱，并能提示LSCC的诊断。

目前尚无有效早期诊断喉鳞状细胞癌的基因检测试剂盒。

发明内容

本发明旨在克服现有技术不足，提供一种早期诊断喉鳞状细胞癌的唾液基因检测试剂盒。

本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：

试剂盒1：

一种早期诊断喉鳞状细胞癌的唾液基因检测试剂盒，含有检测唾液中hsa-miR-544a、 hsa-miR-4726和hsa-miR-154-3p的引物；其中，hsa-miR-544a的特异正向引物序列如Seq.NO. 1所示，hsa-miR-4726的特异正向引物序列如Seq.NO.2所示，hsa-miR-154-3p的特异正向引 物序列如Seq.NO.3所示，各基因的通用反向引物序列如Seq.NO.7所示。

进一步地，还含有检测内参Cel-miRNA-39的引物，其特异正向引物序列如Seq.NO.6 所示。当然，也可以使用其他常用的内参基因作为内参。

进一步地，还含有RT-PCR所需的酶和试剂等。

试剂盒2：

一种早期诊断喉鳞状细胞癌的唾液基因检测试剂盒，含有检测唾液中hsa-miR-544a、 hsa-miR-4726和hsa-miR-655-5p的引物；其中，hsa-miR-544a的特异正向引物序列如Seq.NO. 1所示，hsa-miR-4726的特异正向引物序列如Seq.NO.2所示，hsa-miR-655-5p的特异正向引 物序列如Seq.NO.4所示，各基因的通用反向引物序列如Seq.NO.7所示。

进一步地，还含有检测内参Cel-miRNA-39的引物，其特异正向引物序列如Seq.NO.6 所示。当然，也可以使用其他常用的内参基因作为内参。

进一步地，还含有RT-PCR所需的酶和试剂等。

试剂盒3：