[发明专利]一种左右半结肠腺癌早期筛查检测试剂盒及检测方法

说明书

本发明公开了EDN2基因可以作为左右半结肠腺癌诊断的生物标志物。本发明的实验证明，与癌旁正常组织相比，结肠腺癌组织中EDN2基因表达显著升高；与左半结肠腺癌组织相比，右半结肠腺癌组织中的EDN2基因表达显著升高。根据本发明的研究成果，可以研发用于诊断左右半结肠腺癌的试剂盒。

技术领域

本发明属于生物医学领域，涉及一种左右半结肠腺癌的早期筛查检测试剂盒及检测方法。

背景技术

结肠癌是常见的消化道肿瘤，是美国发病率及致死率排名第三的恶性肿瘤。据统计，2013年美国结肠癌的发病人数约14.3万人，约5.1万人死于结肠癌，仅次于胃癌；相比我国，结肠癌在我国发病率相对较低，是发病率和死亡率排名第五的恶性肿瘤。近年来，随着人民生活水平的改善、饮食结构的调整以及生活方式的转变，结肠癌的发病率呈现逐年提高的趋势；虽然在我国结肠癌的发病率较低，但是基于中国人口的庞大基数，每年我国结肠癌的发病和死亡总例数却超过了美国。据统计，2015年分别有37.6万人发病，约19.1万人死于结肠癌。

结肠腺癌(colon adenocarcinoma，COAD)是结肠癌中类型最常见的一种。根据不同的胚胎学起源及生物学差异，以脾曲为界，可以将结肠腺癌分为左半结肠腺癌(Left-sided colon adenocarcinoma，LSCOAD)和右半结肠腺癌(Right-sided colonadenocarcinoma，RSCOAD)。正因为不同的结肠癌发病部位有着不同的胚胎起源、生理学功能、形态学特点及代谢特点，导致不同部位的肿瘤可能在发病危险因素、临床表现、病理学特征及预后等生物学特性方面存在一定的差异。因此，对不同部位结肠腺癌的生物学特性的研究是很有必要的，对指导结肠腺癌的预防及治疗能起到一定作用。

研究显示，左、右半结肠癌中APC，c-myc，Kras，Braf等与肿瘤发生发展相关的基因均存在差异表达，也有研究提示同一结肠癌的诊断标志物在左、右半结肠癌中可能出现不同的预测作用。为了寻找到更多的用于早期诊断左右半结肠腺癌的生物标志物，而开展了本项研究。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种左右半结肠腺癌早期筛查检测试剂盒。

本发明的目的之二在于提供一种通过检测EDN2基因或蛋白的表达差异来诊断左右半结肠腺癌的方法。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

本发明提供了检测EDN2基因表达水平的产品在制备左右半结肠腺癌早期筛查检测工具中的应用。

进一步，所述检测EDN2基因表达水平的产品包括：通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测EDN2基因表达水平的产品。

更进一步，所述用RT-PCR检测EDN2基因表达水平的产品至少包括一对特异扩增EDN2基因的引物；所述用实时定量PCR检测EDN2基因表达水平的产品至少包括一对特异扩增EDN2基因的引物；所述用免疫检测以检测EDN2基因表达水平的产品包括：与EDN2蛋白特异性结合的抗体；所述用原位杂交检测EDN2基因表达水平的产品包括：与EDN2基因的核酸序列杂交的探针；所述用芯片检测EDN2基因表达水平的产品包括：蛋白芯片和基因芯片；其中，蛋白芯片包括与EDN2蛋白特异性结合的抗体，基因芯片包括与EDN2基因的核酸序列杂交的探针。

优选地，所述用实时定量PCR检测EDN2基因表达水平的产品至少包括的一对特异扩增EDN2基因的引物如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。

本发明还提供了一种左右半结肠腺癌的早期筛查检测工具，所述工具包括能够检测样本中EDN2基因表达量的工具。

进一步，所述工具包括包括能够定量EDN2基因mRNA的试剂，和/或能够定量EDN2蛋白的试剂。