[发明专利]桃转录因子PpERF.A16基因、蛋白、其重组表达载体及应用

说明书

本发明公开了桃转录因子PpERF.A16及其应用。该基因属于ERF家族成员，其核苷酸序列为序列表SEQ ID NO.1所示，编码区序列长度为966bp，编码321个氨基酸，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID NO.2所示。在基因组和RNA SEQ分析的基础上，对乙烯生物合成基因、1‑氨基环丙烷‑1‑羧基合酶和氧化酶和AP2/ERF转录因子进行了分离和分析。经生物学功能验证，表明PpERF.A16基因具有促进乙烯合成的功能。PpERF.A16基因的发现，为促进乙烯合成的分子育种提供新的基因资源，为实施绿色农业提供新的遗传资源，该资源的开发利用有利提高桃果实的商品价值和市场竞争力，延长果实的货架期，有利于降低农业成本和实现环境友好。

技术领域

本发明涉及桃转录因子PpERF.A16基因、蛋白、其重组表达载体及应用，属于植物基因工程领域。

背景技术

果实成熟是指在果实生长发育停止后发生的一系列生理生化反应的复杂有序过程，色泽、风味、香气、质地等多方面多会发生变化，并且果实成熟直接影响到果品的商品价值、采后储藏和市场竞争力。(Giovannoni，2004；Li et al.，2010；田世平，2013)。根据果实在成熟过程中是否出现出现呼吸峰，被分为呼吸跃变型和呼吸非跃变型(Leli E Vre J，1997)。番茄、苹果、香蕉、桃等在果实成熟过程中呼吸强度骤然上升，乙烯释放量增加，均为跃变型果实。葡萄、柑橘、草莓柠檬等在成熟过程中呼吸强度和乙烯释放量没有显著上升，均为非跃变型果实。

乙烯是植物体内一种重要的内源激素。果实生长发育和成熟的过程都与乙烯有密切关系。乙烯合成基本途径：蛋氨酸(Methionine，Met)→S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine，SAM)→1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-amino cyclopropane-1-carboxylic acid,ACC)→乙烯。其中，ACC合成酶(ACS)和ACC 氧化酶(ACO)是两个关键酶。(Hoffman et al，1984；殷学仁，2009；韩延超， 2016)。呼吸跃变型果实的成熟伴随大量乙烯释放。乙烯产生后，随即开启其信号转导之路。首先乙烯与受体结合(ETR)，ERF进一步激活下游的乙烯的三重反应(CTR)，EIN2(Ethylene insensitive 2)和EIN3/EILs(Ethyleneinsensitive 3/Ethylene insensitive 3-like)位于CTR下游，是乙稀信号传导途径中的正调因子，可以结合乙烯响应因子ethylene response factor(ERF)的转录因子(ERF TFs)上游区域(Alexander and Grierson 2002；Guo and Ecker 2003；Solano et al.1998,Guet al.2017)。ERF是乙烯信号转导途径上最后的调控因子，可以结合多个乙烯响应基因的启动子，从而调控乙烯反应。