[发明专利]一种汞离子错配型通用隔断超快扩增比色传感器

权利要求书

1.一种汞离子错配型通用隔断超快扩增比色传感器，其特征在于，包括：(1)sPCR扩增体系，(2)包含ABTS显色液的检测体系，所述检测体系用于对待测样品经由所述sPCR扩增体系进行扩增后所得产物进行显色检测；

其中，所述sPCR扩增体系包括：模板、正向引物和反向引物；

所述模板为：

TCATCGCACCGTCAAAGGAACCTCAGTATCAGTGCTATACGTCGATCAGTACCTCCTCCATGATAAGTCACGATTGTTGTTGCGATAGCGCCAGC；

所述正向引物为：

GTGGGTAGGGCGGGTTGG-隔断-CCAACCCGCCCTACCCACTCATCGCACCGTCAAAGGAACC；

所述反向引物为：

GTGGGTAGGGCGGGTTGG-隔断-CCAACCCGCCCTACCCACGCTGGCGCTATCGCTTCTTCTT。

2.根据权利要求1所述的传感器，其特征在于，所述正向引物和反向引物中的隔断为聚六乙二醇。

3.根据权利要求1或2所述的传感器，其特征在于，所述检测体系包括：酶活缓冲液和氯高铁血红素溶液；

所述酶活缓冲液为：100mM Tris、120mM NaCl、10mM MgCl₂和100mM KCl，pH8.4。

4.权利要求1～3任一项所述的传感器在检测汞离子方面中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述检测为定性检测或定量检测。

6.一种利用权利要求1～3任一项所述的传感器对汞离子进行定性检测的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、利用所述sPCR扩增体系分别对待测样品和阴性对照样品进行超快聚合酶链式反应，得sPCR产物；

S2、利用所述检测体系对所述sPCR产物进行检测：

S21、配制检测体系：

将酶活缓冲液、氯高铁血红素稀释溶液和sPCR产物按体积比为8:1:1混匀；

S22、在37℃条件下反应30min，加入与S21所得混合物等量体积的ABTS显色液，混匀，37℃避光孵育10min，肉眼监测；

依据待测样品与阴性对照样品的颜色差异进行汞离子的定性判断；

所述阴性对照样品为不含有汞离子的去离子水。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述S1中：

sPCR反应体系为：

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述S1中，将配置好的sPCR反应体系迅速置于sPCR反应装置中进行温度控制：

90-95℃2s，55-60℃3s，30-40个循环。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述S1中，将配置好的sPCR反应体系迅速置于sPCR反应装置中进行温度控制：

95℃2s，58℃3s，36个循环。

10.一种利用权利要求1～3任一项所述的传感器对汞离子进行定量检测的方法，其特征在于，包括如下步骤：

SI、制作标准曲线：

利用已知浓度的汞离子溶液，构建具有不同汞离子浓度的sPCR体系，扩增与检测步骤与权利要求6中的S1和S2相同；

以汞离子浓度为横坐标，以OD415值为纵坐标，绘制标准曲线；

SII、按照权利要求6所述的方法对待测样品进行检测，将测得的OD415值代入标准曲线，计算得到待测样品中汞离子的含量，实现对汞离子的定量检测。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述不同汞离子浓度的浓度区间为1nM～100nM。