[发明专利]一种用于轴向超薄切片的纤维状样品的包埋方法

说明书

本发明公开了一种用于轴向超薄切片的纤维状样品的包埋方法，包括以下步骤：将纤维状样品固定在衬底之上，使所述纤维状样品在所述衬底上呈直线型；在开口容器中加入液体包埋剂，然后将固定有纤维状样品的衬底盖在所述开口容器顶部，使所述衬底的固定有纤维状样品的表面朝向开口容器；固定所述衬底和开口容器，然后一体化翻转所述衬底和开口容器，使所述开口容器倒扣在衬底的固定有纤维状样品的表面之上；固化所述液体包埋剂形成包埋块，分离所述开口容器和所述衬底，所述纤维状样品位于所述包埋块的最顶端位置，得到经过包埋的用于轴向超薄切片的纤维状样品。本发明的方法可精确定位样品位置，显著提高后期修块效率和切片的成功率。

技术领域

本申请涉及超薄切片技术领域，具体来说，涉及一种用于轴向超薄切片的纤维状样品的包埋方法。

背景技术

在对包括纤维的纤维状样品进行轴向超薄切片的传统方法中，通常将纤维状样品放入包埋板内，然后倒入树脂进行包埋，再对得到的包埋块进行超薄切片处理。但这种方法通常难以确保纤维状样品直接裸露于包埋块的待切端。在后续修块过程中，在显微镜下一般难以对被包埋的纤维材料进行准确定位，很可能造成误切，进而导致用透射电镜(TEM)观察切片时找不到需要表征的纤维状样品，这会大大浪费工作人员的时间和精力。尤其对于无色透明或颜色与固化后的包埋剂相接近的纤维材料，由于颜色与所用的包埋树脂基体相近，修块和切片过程中难以对样品位置进行准确定位的问题更加突出。另外更为重要的一点是，使用传统包埋方法得到的超薄切片无法保证切到的样品位置即为平行于纤维的轴向方向，一般较易得到随机的不平行于纤维轴向方向的椭圆形切面。

为此，本领域迫切需要开发一种可准确定位样品位置的用于轴向超薄切片的纤维状样品的包埋方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于轴向超薄切片的纤维状样品的包埋方法，该方法得到的树脂包埋块头部呈玻璃样光亮，样品在包埋块内清晰可见，树脂块正面无需再用修块机进行粗修，可使用钻石刀直接进行切片。该包埋方法克服了前期用环氧树脂包埋纤维后，超薄切片修块时无法对其进行准确定位的问题，大大提高了后期修块效率和切片的成功率。

本申请的另一个目的是提供一种对纤维状样品进行轴向超薄切片的方法，所述方法包括利用如第一方面所述的方法来制备经过包埋的用于轴向超薄切片的纤维状样品，且其中无需对包埋块的正面进行粗修。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明的第一个方面提供了一种用于轴向超薄切片的纤维状样品的包埋方法，包括以下步骤：

第一步：将纤维状样品固定在衬底之上，使所述纤维状样品在所述衬底上呈直线型；

第二步：在开口容器中加入液体包埋剂，然后将固定有纤维状样品的衬底盖在所述开口容器顶部，使所述衬底的固定有纤维状样品的表面朝向开口容器；

第三步：固定所述衬底和开口容器，然后一体化翻转所述衬底和开口容器，使所述开口容器倒扣在衬底的固定有纤维状样品的表面之上；

第四步：固化所述液体包埋剂形成包埋块，分离所述开口容器和所述衬底，所述纤维状样品位于所述包埋块的最顶端位置，得到经过包埋的用于轴向超薄切片的纤维状样品。

所述纤维状样品包括动物纤维、人造纤维或合成纤维。

所述第一步中，将纤维状样品固定在衬底之上包括用双面胶将纤维状样品固定到衬底之上。

所述第二步中，所述液体包埋剂为Ted Pella公司的环氧树脂Epon812。

所述第二步中，在开口容器中加入液体包埋剂包括在开口容器中加入液体包埋剂，直到所述液体包埋剂的液面与所述开口容器的上表面齐平，该过程中应尽量避免在样品区域产生气泡。

所述第三步中，固定所述衬底和开口容器包括手动按压固定所述衬底和所述开口容器。