[发明专利]一种酪胺的高效液相色谱检测方法有效
申请号: | 201810639692.2 | 申请日: | 2018-06-20 |
公开(公告)号: | CN108760931B | 公开(公告)日: | 2020-09-15 |
发明(设计)人: | 张思雨;何连顺;李斌水;米造吉;马静 | 申请(专利权)人: | 精晶药业股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人: | 郝晓红 |
地址: | 055550*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高效 色谱 检测 方法 | ||
1.一种酪胺的高效液相色谱检测方法,其特征在于:
色谱条件为:
色谱柱:氨基键合硅胶柱;
流动相:0.05mol/L磷酸盐缓冲液与乙腈的体积比为35:65;其中,磷酸盐缓冲液的pH值为2.5-6.0;
流动相流速:0.7-1.0mL/min;
检测波长:205-225nm;
色谱柱柱温:25-40℃;
检测步骤为:
(1)配制流动相,过滤,脱气;
(2)调节高效液相色谱仪条件,平衡色谱柱;
(3)对照品溶液和供试品溶液的配制:称取酪胺对照品和酪胺供试品,分别用流动相溶解定容,即得;
(4)将对照品溶液、供试品溶液过滤后注入高效液相色谱仪,记录色谱图及峰面积,采用外标法计算酪胺的含量。
2.根据权利要求1所述的一种酪胺的高效液相色谱检测方法,其特征在于:所述磷酸盐缓冲液为磷酸二氢钾缓冲液。
3.根据权利要求1所述的一种酪胺的高效液相色谱检测方法,其特征在于:流动相流速为0.7mL/min。
4.根据权利要求1所述的一种酪胺的高效液相色谱检测方法,其特征在于:检测波长为215nm。
5.根据权利要求1所述的一种酪胺的高效液相色谱检测方法,其特征在于:色谱柱柱温为30℃。
6.根据权利要求1所述的一种酪胺的高效液相色谱检测方法,其特征在于:磷酸盐缓冲液的pH值为4.0。
7.根据权利要求1所述的一种酪胺的高效液相色谱检测方法,其特征在于:步骤(3)中,对照品溶液的浓度为0.02mg/mL。
8.根据权利要求1所述的一种酪胺的高效液相色谱检测方法,其特征在于:步骤(3)中,供试品溶液的配制为:将含有酪胺的生物转化液0.5ml,用流动相稀释至25ml,再将摇匀后的溶液稀释50倍体积。
9.根据权利要求1所述的一种酪胺的高效液相色谱检测方法,其特征在于:色谱柱长度为250mm,内径为4.6mm,其填料粒径为5μm。
10.根据权利要求1所述的一种酪胺的高效液相色谱检测方法,其特征在于:步骤(4)中,对照品溶液和供试品溶液的色谱柱进样体积均为20μl。
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