[发明专利]一种真菌防御素的重组制备方法及其应用有效
| 申请号： | 201810642773.8 | 申请日： | 2018-06-21 |
| 公开（公告）号： | CN108752455B | 公开（公告）日： | 2022-03-08 |
| 发明（设计）人： | 陈宗运;罗旭东;丁莉;周明华;叶祥东 | 申请（专利权）人： | 湖北医药学院 |
| 主分类号： | C07K14/47 | 分类号： | C07K14/47;C12N15/12;C12N15/70;A61K38/16;A61P31/04 |
| 代理公司： | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人： | 唐宁 |
| 地址： | 442000 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 真菌 防御 重组 制备 方法 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种真菌防御素的重组制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)通过overlap PCR获得包含SEQ ID NO.5所示的编码真菌防御素的核酸分子；
(2)构建包含步骤(1)所述核酸分子的pET-32a载体；
(3)IPTG诱导重组真菌防御素表达；
(4)纯化重组真菌防御素多肽；
所述的编码真菌防御素的核酸分子通过overlap PCR获得；所述overlap PCR使用SEQID NO .9-12所示引物序列进行扩增。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，纯化步骤包括：
1)半透膜透析步骤；
2)超滤步骤；
3)酶切步骤；
4)HPLC纯化步骤。
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