[发明专利]一种人参皂苷Ro的制备方法

权利要求书

1.一种人参皂苷Ro的制备方法，所述方法包括使用保藏编号为CGMCC No.3.3262的梅林青霉菌株转化底物齐墩果酸。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述方法包括使用保藏编号为CGMCC No.3.3262的梅林青霉菌株在全自动发酵罐中经发酵转化底物齐墩果酸。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述方法包括以下步骤：

1)将保藏编号为CGMCC No.3.3262的梅林青霉菌株从固体土豆培养基接种至预先配制好的液体土豆培养基中，置于全自动发酵罐中进行培养获得发酵液；

2)将齐墩果酸溶于甲醇、乙醇或其水溶液中，制备为10～100g/L的溶液，加入到步骤1)得到的发酵液中继续发酵培养；

3)收集步骤2)得到的发酵液，离心甩滤后收集滤液，减压浓缩至原体积的1/10～1/20，用大孔树脂柱层析分离，以体积比为70:30～0:100的不同浓度的水-乙醇或水-甲醇洗脱，富集转化产物，即为人参皂苷Ro。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，在步骤1)中，所述固体土豆培养基包含10～50g/L的葡萄糖和10～20g/L的葡萄糖醛酸。

5.根据权利要求3所述的方法，其中，在步骤1)中，所述固体土豆培养基包含20～40g/L的葡萄糖和12～18g/L的葡萄糖醛酸。

6.根据权利要求3所述的方法，其中，在步骤1)中，所述固体土豆培养基包含30g/L的葡萄糖和15g/L的葡萄糖醛酸。

7.根据权利要求3所述的方法，其中，在步骤1)中，所述液体土豆培养基包含10～50g/L的葡萄糖和10～20g/L的葡萄糖醛酸。

8.根据权利要求3所述的方法，其中，在步骤1)中，所述液体土豆培养基包含20～40g/L的葡萄糖和12～18g/L的葡萄糖醛酸。

9.根据权利要求3所述的方法，其中，在步骤1)中，所述液体土豆培养基包含30g/L的葡萄糖和15g/L的葡萄糖醛酸。

10.根据权利要求3所述的方法，其中在步骤1)中，所述培养条件如下：

培养温度为24～32℃，pH值为4～6，通气比为0.1～10％(v/v)，搅拌速率为100～360rpm，发酵培养24～72小时。

11.根据权利要求3所述的方法，其中在步骤1)中，所述培养条件如下：

培养温度26～30℃，pH值为4.5～5.5，通气比为1～8％(v/v)，搅拌速率为180～260rpm，发酵培养36～60小时。

12.根据权利要求3所述的方法，其中在步骤1)中，所述培养条件如下：

培养温度28度，pH值为5，通气比为5％(v/v)，搅拌速率为200rpm，发酵培养48小时。

13.根据权利要求3所述的方法，其中，在步骤2)中，将齐墩果酸溶于甲醇、乙醇或其水溶液中，制备为20～80g/L的溶液。

14.根据权利要求3所述的方法，其中，在步骤2)中，将齐墩果酸溶于甲醇、乙醇或其水溶液中，制备为40～50g/L的溶液。

15.根据权利要求3所述的方法，其中，在步骤2)中，所述发酵培养的条件如下：

培养温度为24～32℃，搅拌速率为100～360rpm，发酵培养时间48～120小时。

16.根据权利要求3所述的方法，其中，在步骤2)中，所述发酵培养的条件如下：

培养温度26～30℃，搅拌速率为200～300rpm，发酵培养时间60～96小时。