[发明专利]一种人工林枝叶黄酮类化合物耦合提取方法

说明书

本发明属于植物活性物质提取技术领域，公开了一种人工林枝叶黄酮类化合物耦合提取方法，包括如下步骤：将人工林枝叶粉碎原料与果胶酶水溶液按照料液比1:8～16混合，在40～70℃水浴条件下浸泡处理30～60min，过滤后得到滤渣和滤液；将得到的滤渣按照料液比1:6～14与体积百分含量为50％～80％的乙醇混合，在40～60℃下超声提取30～80min，过滤后取滤液；合并前两次得到的滤液。本发明的果胶酶处理与超声辅助耦合提取，提取的活性成分得率最高，比传统的有机溶剂提取得率高于20％以上，比超声波辅助提取高6％以上，是一种低温、绿色、高效提取方法。

技术领域

本发明属于植物活性物质提取技术领域，具体涉及一种人工林枝叶黄酮类化合物酶处理与超声波辅助耦合高效提取方法。

背景技术

我国是世界上最大的人工林种植面积国家之一。人工林是采用人工播种、栽植或扦插等方法和技术措施营造培育而成的森林，由人工造林或人工重新造林建立。人工林可以是引进新品种或是对本土树种的加强管理，按树种分为人工桉树林、人工马尾松林、人工杨树林、人工红豆杉等。人工林速生树种生长快、发展迅速、创汇多、同时兼有生态效益。

我国人工林非木质资源丰富，但对该资源的利用率低，未得到很好的利用。如桉树枝叶是桉树工业加工中的一种废弃物，通常直接扔掉，造成环境污染。桉树枝叶中含有丰富高附加值的生物活性成分，如酚类化合物、黄酮类化合物、多糖及皂苷等，具有抗肿瘤、抗菌、抗氧化、抗衰老和抗病毒等生物活性作用，具有广泛的应用前景，但目前未得到很好的利用。黑荆树(Acacia mearnsii)是含羞草科金合欢属树种，速生、常绿乔木，原产于澳大利亚，1950年后在中国广东、广西、福建、云南等地开始引种。黑荆树枝叶中含有多酚类化合物、原花色素、黄酮类化合物等活性物质。具有抗糖尿病、抗炎、抗氧化、抗癌、防治心脑血管疾病等生物活性作用，黑荆树枝叶是一种可制备附加值高的天然生物活性制剂的原料。红豆杉中所含的紫杉醇具有独特的抗癌作用和显著的疗效，常被用来治疗乳腺癌、卵巢癌、肺癌、食管癌等恶性肿瘤。但红豆杉种紫杉醇含量极低，而其中还含有如黄酮类化合物，多糖等生物活性较强的物质，如只利用红豆杉中的紫杉醇，则严重降低了红豆杉资源的利用率。所以对红豆杉枝叶中的黄酮类化合物提取和分离，提高红豆杉资源的综合利用率。

目前国内对黄酮类化合物提取方法主要为有机溶剂提取法、超声波辅助提取法和超临界流体萃取法。超临界流体萃取法设备费用高，生产能力低。传统的溶剂提取法具有溶剂耗量大，提取温度高，提取时间长，提取率低，有效成分损失大以及生产成本高等缺点，在工业化生产中的可行性差。

发明内容

针对我国人工林枝叶资源利用率低，活性物质黄酮类化合物提取率不高的问题，本发明提出一种人工林枝叶黄酮类化合物耦合提取的方法，提高活性成分黄酮类化合物的提取效率。

本发明的技术方案如下：

一种人工林枝叶黄酮类化合物耦合提取方法，包括如下步骤：

(1)将人工林枝叶粉碎原料按照料液比1:8～16与果胶酶水溶液混合，在40～70℃水浴条件下酶解30～60min，过滤后得到酶解滤渣和酶解滤液；

(2)将步骤(1)得到的酶解滤渣按照料液比1:6～14与体积百分含量为50％～80％的乙醇混合，在40～60℃下超声提取30～80min，过滤后取滤液；

(3)合并步骤(1)和步骤(2)的滤液，得到的总滤液中含有黄酮类化合物。

优选的，所述果胶酶的质量占所述枝叶粉碎原料干重的0.05～0.5％。

优选的，所述果胶酶水溶液的质量浓度为0.005～0.025％。

优选的，所述步骤(2)超声的功率独立地为120～240W。

优选的，所述枝叶为桉树枝叶、黑荆树枝叶或红豆杉枝叶。