[发明专利]检测乳腺癌脑转移的miRNA组合及含有该组合的试剂盒在审

专利信息
申请号: 201810647475.8 申请日: 2018-06-22
公开(公告)号: CN108588226A 公开(公告)日: 2018-09-28
发明(设计)人: 徐茜;刘丽娜;白方会;阚云超;其他发明人请求不公开姓名 申请(专利权)人: 南阳师范学院
主分类号: C12Q1/6886 分类号: C12Q1/6886;C12N15/113
代理公司: 郑州铭晟知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 41134 代理人: 张鹏
地址: 473061 河南*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 试剂盒 乳腺癌 检测乳腺癌 正反向引物 肿瘤异质性 临床治疗 预后效果 脑转移 乳腺癌脑转移 逆转录试剂 阳性对照品 单一标记 低灵敏度 生物芯片 荧光定量 预后检测 指南 数字PCR 标记物 灵敏性 脑脊液 制备 改进
【权利要求书】:

1.检测乳腺癌脑转移的miRNA组合,其特征在于,包括miR-10b分子,以及miR-200a、miR-122、miR-21、miR-181c分子中的一个或多个。

2.用于检测乳腺癌脑转移的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述检测乳腺癌脑转移的miRNA组合的正反向引物、外参U6 RNA的正反向引物、脑脊液RNA提取系统、逆转录试剂、PCR扩增试剂和cDNA混合阳性对照品。

3.根据权利要求2所述用于检测乳腺癌脑转移的试剂盒,其特征在于,所述miRNA和外参U6 RNA的正反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ IDNO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9、SEQ IDNO.10、SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示。

4.根据权利要求2所述用于检测乳腺癌脑转移的试剂盒,其特征在于,所述cDNA混合对照品的制备方法为:将乳腺癌脑转移患者脑脊液样本提取的总RNA混合后,逆转录并稀释,得cDNA混合阳性对照品。

5.根据权利要求2所述用于检测乳腺癌脑转移的试剂盒,其特征在于,所述脑脊液RNA提取系统包括裂解液、HiBind RNA结合柱、RNA wash buffer I、RNA wash buffer II和收集管。

6.根据权利要求2所述用于检测乳腺癌脑转移的试剂盒,其特征在于,所述逆转录试剂为5× iScript Reaction Mix、iScript Reverse Transcriptase和RNase free dH2O。

7.根据权利要求2所述用于检测乳腺癌脑转移的试剂盒,其特征在于,所述PCR扩增试剂为5× FastStart Universal SYBR Green Master (ROX)和RNase free dH2O。

8.根据权利要求1所述检测乳腺癌脑转移的miRNA组合,其特征在于,上述检测乳腺癌是否出现脑转移患者的miRNA表达差异情况分三种:(1) miR-10b分子,以及miR-200a、miR-122、miR-21、miR-181c分子中的一个或多个均阳性表达,此时说明患者出现脑转移;(2)miR-10b阴性表达,但是miR-200a、miR-122、miR-21、miR181c分子中的两个或两个以上均阳性表达,此时说明患者出现脑转移;(3)miR-10b、 miR-200a、miR-122、miR-21、miR-181c分子均阴性表达,此时说明患者未出现脑转移,建议定期复查。

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