[发明专利]矮牵牛ASRs基因组及其应用

说明书

本申请属于矮牵牛生物育种技术领域，具体涉及矮牵牛ASRs基因组及其应用的专利申请。该基因组包括ASR1、ASR2和ASR3三个基因，这3个基因编码R2R3‑MYB类型的转录因子，分别与花青素合成调控相关；即，分别与调控飞燕草色素合成相关。与植物中已经发现的其他花青素合成相关的R2R3‑MYB类型的转录因子建立进化树表明，这三个基因与AN2、DPL、AN4、PHZ等位于同一进化分支上。转基因超表达结果表明，ASR1/2/3特异性的调控飞燕草色素合成相关的通路。本申请对矮牵牛中蓝色/紫色花瓣调控的分子基础进行了初步梳理，为将来利用这三个基因创制蓝色/紫色等相关的花卉新品种奠定了基础。

技术领域

本申请属于矮牵牛生物育种技术领域，具体涉及矮牵牛ASRs基因组及其应用的专利申请。

背景技术

花瓣颜色是花卉的重要观赏性状，一定程度上决定着花卉的经济价值。研究表明，植物的花色主要是由花青素决定的，其在花瓣细胞中的成分和含量决定着花瓣的呈色。

花青素是一类类黄酮，其合成通过一系列花青素合成结构基因控制，并受一些转录因子的调控。对矮牵牛花色的研究发现，调控花青素合成的转录因子有编码bHLH类型的基因AN1，编码WD40类型的基因AN11及编码R2R3-MYB类型的基因AN2、AN4、DPL及PHZ等。其中：R2R3-MYB类型的转录因子在调控花青素的合成中起着主要作用，他们决定着花青素合成的时间及合成部位；AN2主要在矮牵牛的花瓣中表达，决定着花瓣的呈色；AN4主要在雄蕊中表达，并在雄蕊的呈色过程中起着重要作用；DPL和PHZ主要在花脉和花冠中特异表达，并在营养器官受强光条件诱导的呈色过程中起着重要作用。基于这些已有研究，使得人们对于矮牵牛花瓣颜色变化的分子机制有了初步了解。但是由于花瓣颜色变化原因复杂多样，受多种基因表达与调控影响，因而对于与色素形成相关基因加强研究，对于花色形成的分子机理研究及进一步的花卉新品种的培育都具有十分重要的科研理论意义与实用价值。

发明内容

本申请目的在于提供一个矮牵牛（Petunia）基因组中的编码R2R3-MYB类型转录因子的ASRs基因组，该基因组包括ASR1、ASR2和ASR3三个基因，从而为矮牵牛花瓣颜色形成的分子基础研究及新品种培育奠定理论基础。

本申请所采取的技术方案详述如下。

一个矮牵牛ASRs基因组，该基因组包括ASR1、ASR2和ASR3三个基因，碱基序列分别如SEQ ID NO.1~3所示，这3个基因分别编码一个R2R3-MYB类型的转录因子，分别与花青素合成调控相关；

所述ASR1（也即：ASR1^inf）的碱基序列，包括1511bp，具体参见实施例部分内容；

所述ASR2（也即：ASR2^inf）的碱基序列，包括1535 bp，具体参见实施例部分内容；

所述ASR3（也即：ASR3^inf）的碱基序列，包括1503bp，具体参见实施例部分内容。

所述矮牵牛ASRs基因组在花色调控中的应用，该基因组的ASR1、ASR2和ASR3三个基因分别与花青素合成调控相关，具体而言，与调控飞燕草色素合成相关。

利用所述矮牵牛ASRs基因组所构建的超表达重组载体，具体而言，利用gateway技术，分别将ASRs基因组的ASR1、ASR2和ASR3三个基因转化进入超表达载体pK2GW2.0/rfa中。

对所述矮牵牛ASRs基因组的PCR扩增方法，以含有ASRs基因组基因的矮牵牛品种的DNA作为PCR扩增用模板，分别对三个基因进行PCR扩增，PCR扩增时具体引物序列设计为：

扩增ASR1基因时引物为：

ASR1-Fw：GGGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTATGAATACTATTGTTATCTGTAC，