[发明专利]奶牛早期乳腺炎症监测方法

说明书

本发明提供了一种奶牛早期乳腺炎症监测方法，包括如下步骤：(1)对牛奶进行SCC计数检测；(2)对牛奶进行病原微生物鉴定：包括菌落数计数和细菌学鉴定；(3)对牛奶进行体细胞分型检测；(4)对牛奶进行蛋白质差异表达水平及功能鉴定：包括蛋白质浓度测定、蛋白质定量、分析蛋白差异表达水平及功能鉴定。该方法通过对牛乳体细胞中免疫细胞的分化程度的检测及对乳蛋白与乳中菌体蛋白的表达水平与功能进行鉴定，有助于及时发现早期乳腺炎症的发生，同时有助于发现诱发早期炎症的病原体种类，为奶牛乳腺炎症的及时预防和针对性的治疗做好充分准备。

技术领域

本发明属于畜牧业领域，具体地说，涉及一种奶牛早期乳腺炎症监测方法，主要应用于奶牛早期乳腺炎症与亚临床乳腺炎症的及早筛查。

背景技术

奶牛乳腺健康是牛奶生产的关键问题，监测乳腺的健康状况对于奶牛场经济来说是非常重要的。奶牛乳腺炎症会降低乳产量和质量，奶牛生育力甚至缩短寿命，严重影响奶牛场收入。炎症发生时乳腺内的免疫应答是反映炎症阶段的重要指示。因此，通过了解奶牛乳腺对炎症的免疫应答过程，进而及时掌握奶牛乳腺健康状态，可以改善牛奶生产质量并降低乳腺炎症的治疗成本。

在生产实际中应用作为广泛的判断乳腺炎症的方法是通过-体细胞数(SCC)。牛奶体细胞数(SCC)是反映奶牛乳房健康状况的重要指标之一，该指标偏高意味着奶牛可能处于亚健康或疾病状态。目前，已有部分国家对用于乳制品加工的生鲜乳制定了严格的SCC标准。世界各国SCC标准不同，表1为部分国家和地区生鲜乳SCC标准，其中日本对生乳中SSC的要求最为严格(规定每毫升牛乳中SCC少于30万个)。我国虽还没有对SSC标准作出明确规定，但规定了生鲜牛乳中SCC测定的标准方法。在奶牛正常生理状态下，牛奶体细胞的组成和数量都是基本稳定的，而当乳房外伤或疾病发生(如乳腺炎等)时，会导致牛奶SCC增多，进而造成产奶量降低，乳品质量下降等。牛奶的品质关系到消费者的健康，因此，确保生鲜乳的质量安全是奶牛养殖工作者必须着手解决的首要问题。

表1部分国家和地区SCC标准

但体细胞数法存在以下限制性：(1)各个国家与不同地域之间，用于判断奶牛乳腺健康状况的SCC标准，存在较大差异。到底健康乳腺、亚临床乳腺炎症和重度乳腺炎症的界限划分为多少，更为准确？(2)引起SCC变化的因素众多(例如，季节，气候，胎次，管理因素等)，不只是炎症这一个因素。从这一角度而言，仅依靠SCC判断乳腺炎症的发生及炎症阶段，显然是不够准确的。(3)SCC只是基于乳中细胞总数量的炎症量度，它无法准确的判断炎症发生的阶段。现实中奶牛隐性乳腺炎的发病率较高，虽然隐性乳腺炎没有临床症状，却可以引起奶产量的急剧减少。

奶牛乳腺内感染(IMI)的诊断一直以来主要基于SCC和细菌学分析。目前认为SCC＜100,000个细胞/mL的牛奶样本是健康的或处于正常的生理学范围内。在这些健康乳腺内也可能已经发生了炎症反应。实际上，SCC在炎症反应的初始阶段很低，直到入侵的病原体被释放化学引诱物的免疫细胞识别，从而刺激PMN的迁移。

因此有必要开发一种奶牛早期乳腺炎症监测方法，为奶牛乳腺炎症的及时预防和针对性的治疗做好充分准备。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种奶牛早期乳腺炎症监测方法，此方法主要应用于牛奶养殖场对奶牛乳房实际健康状况更为准确的判断，特别是对易忽视的低体细胞数(SCC＜200,000个/mL)的奶牛群。通过对其乳体细胞中免疫细胞的分化程度的检测及对乳蛋白与乳中菌体蛋白的表达水平与功能进行鉴定，有助于及时发现早期乳腺炎症的发生，同时有助于发现诱发早期炎症的病原体种类，为奶牛乳腺炎症的及时预防和针对性的治疗做好充分准备。

本发明技术方案如下：

一种奶牛早期乳腺炎症监测方法，所述方法包括：测定所述乳腺健康奶牛的牛奶样品中体细胞至少一种标志物的水平，标志物包括PMN比例和/或蛋白质表达，其中PMN比例增多，表示早期炎症发生。