[发明专利]CRYGD蛋白的应用

说明书

本发明属于生物技术领域，公开了CRYGD蛋白的应用及一种CRYGD蛋白的重组质粒。本发明所述CRYGD蛋白的重组质粒，为含有编码所述CRYGD蛋白核苷酸序列的基因载体转化宿主细胞后提取获得。CRYGD过表达质粒表达的CRYGD蛋白能够抑制视网膜祖细胞(RPC)及视网膜色素上皮细胞(RPE)的凋亡，可以作为视网膜祖细胞及视网膜色素上皮细胞凋亡的抑制剂，用于预防或治疗视网膜色素变性、黄斑变性、糖尿病视网膜病变等疾病。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及CRYGD蛋白的应用，尤其是涉及CRYGD蛋白在制备预防或治疗视网膜退行性病变的药物中的应用。

背景技术

视网膜退行性病变(Retinal degeneration)是由于视网膜细胞死亡引发的一系列眼睛疾病的统称，包括视网膜色素变性(Retinitis Pigmentosa，RP)和年龄相关性黄斑变性(Age-related macular degeneration，ARMD)、糖尿病视网膜病变等疾病。其中视网膜色素变性是一组由于视网膜光感受器(视锥细胞和视杆细胞)退化及视网膜色素上皮变性为主要特征的进行性可致盲的遗传性视网膜疾病，世界范围内发病率约为1/3 500。RP的临床特点主要有进行性视野缩小、夜盲、后极部或赤道部出现骨细胞样色素沉着、视神经乳头蜡黄、视网膜电流图(electrore-tinogram，ERG)显著异常或无波形等。因其发病机制主要为细胞凋亡，目前该类疾病尚无有效的预防和治疗方法，多年来各国科学家努力探索尝试各种方法治疗视网膜退行性病变，到目前为止方法有以下三种：

(1)神经营养因子注射法。试验证明神经营养因子可以推迟或控制感光细胞的凋亡，从而达到治疗视网膜退行性病变的目的。但是，绝大多数的营养因子只有通过眼内注射起到治疗作用，而由于该方法不能长效供应营养，需要多次注射，易造成感染和视网膜脱离等并发症，其风险远远大于所获得的收益，所以该类方法仍需要进一步探索和研究。

(2)细胞治疗方式。将细胞通过各种途径运输到眼内，通过细胞持续释放神经保护因子或细胞替代等方式治疗视网膜退行性病变。常用于治疗的细胞主要有：①胚胎干细胞(ES)：它具有分化成多种细胞的能力，但是这种细胞存在伦理、免疫排斥和畸胎瘤等问题，不适合临床应用；②多能诱导干细胞(iPS)：指将正常的成熟细胞在体外重编程为多能诱导干细胞，从理论上具有多向分化能力，但是它存在病毒整合和表达异常等问题；③间充质干细胞(MSC)：这种细胞具有有限的分化能力，取材方便，可以自体治疗，但是由于它有限的分化能力，因此在视网膜疾病治疗中的成功率并不高。

(3)基因治疗方式：主要指利用病毒或非病毒载体将目的基因或功能基因转运到眼内，使载体遗传信息与受体遗传信息进行重新整合，从而从基因水平修复错配、突变等基因，达到治疗目的。

基因治疗RP取得了较大的进展。研究发现能够引起视网膜感光细胞变性相关的基因有140余种，其中32个基因已被克隆。目前已建立了多种RP的动物模型，包括视网膜变性小鼠、慢性视网膜变性(retinal degen-eration slow，rds)小鼠、皇家外科学院(RoyalCollegeof Surgeons，RCS)大鼠，为RP发病机制及治疗研究提供了帮助。与RP相关的基因所编码的蛋白质主要与光级酶联反应或视紫质光代谢、光感受器结构蛋白、光感受器细胞转录因子有关，目前研究表明RP病理变化均以细胞凋亡为共同途径。目前治疗Leber先天性黑矇(leber congenital amaurosis，LCA)的一期临床研究已经取得初步成功，这也为基因治疗RP带来了新的希望。