[发明专利]一种细胞模型及其制备方法、应用有效
申请号: | 201810664195.8 | 申请日: | 2018-06-25 |
公开(公告)号: | CN110628821B | 公开(公告)日: | 2022-02-18 |
发明(设计)人: | 陈志国;王淑艳;徐大为 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学宣武医院 |
主分类号: | C12N15/86 | 分类号: | C12N15/86;C12N5/10;C12Q1/02 |
代理公司: | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人: | 李静 |
地址: | 100053*** | 国省代码: | 北京;11 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 模型 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种利用沃纳综合征(WS)患者的体细胞诱导多能干细胞的方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、源于WS患者的体细胞的获取;获取的WS体细胞为成纤维细胞AG03141;
S2、将同时表达人端粒酶逆转录酶和抗性基因的载体转染至所述体细胞中并进行培养,筛选出能够表达人端粒酶逆转录酶的所述体细胞;所述表达人端粒酶逆转录酶的骨架载体为慢病毒载体;所述的慢病毒载体为pLVX-Tight-Puro;
S3、向S2步骤中筛选的所述体细胞中转染携带有诱导iPSCs的重编程基因的载体,并进行iPSCs培养;所述重编程基因为OCT4、 SOX2、c-MYC和 KLF-4;所述载体为仙台病毒。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在S2步骤中,在转染表达人端粒酶逆转录酶的载体的同时转染可调控外源基因表达的载体。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,在S2步骤中,用于所述调控外源基因表达载体的骨架载体为pLVX-Tet-on Advanced。
4.权利要求1-3任一项所述的方法制备得到的诱导多能干细胞,其命名为人诱导多功能干细胞,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号为CGMCCNo.14895。
5.权利要求1-3任一项所述的方法制备得到的诱导多能干细胞或权利要求4所述的诱导多能干细胞在成年早衰症、肿瘤、动脉粥样硬化、糖尿病或骨质疏松症的疾病发病机制研究或药物筛选领域用途。
6.一种细胞模型,其特征在于,包括权利要求1-3任一项所述的方法制备得到的诱导多能干细胞或权利要求4所述的诱导多能干细胞。
7.权利要求6所述的细胞模型在成年早衰、肿瘤、动脉粥样硬化、糖尿病或骨质疏松症的疾病发病机制研究或药物筛选领域用途。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于首都医科大学宣武医院,未经首都医科大学宣武医院许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810664195.8/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:一种光控基因转录抑制系统及抑制、构建方法
- 下一篇:重配BTV和AHSV疫苗