[发明专利]宫颈癌生物标志物检测试剂盒在审
| 申请号： | 201810664483.3 | 申请日： | 2018-06-25 |
| 公开（公告）号： | CN110628902A | 公开（公告）日： | 2019-12-31 |
| 发明（设计）人： | 不公告发明人 | 申请（专利权）人： | 湘潭智联技术转移促进有限责任公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 31253 上海精晟知识产权代理有限公司 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 410100 湖南省湘潭市高新区*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 扩增 焦磷酸测序 生物标志物 检测试剂 扩增产物 扩增效率 宫颈癌 退火 扩增引物序列 强碱性试剂 测序引物 扩增片段 扩增引物 目标片段 实验步骤 线性指数 单链DNA 启动子 测序 错配 双链 位点 损伤 检测 | ||
1.一种宫颈癌生物标志物检测试剂盒，其特征在于，所述宫颈癌生物标志物检测试剂盒由高效扩增组和焦磷酸测序组组成，检测TNF-α启动子rs361525位点，其中：高效扩增组包括测序引物和Taq DNA聚合酶，扩增引物序列如序列表SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示，扩增产物退火后经焦磷酸测序组测序。
2.根据权利要求1所述的宫颈癌生物标志物检测试剂盒，其特征在于：所述扩增引物中一个为过量引物，另一个为限制性引物。
3.根据权利要求1所述的宫颈癌生物标志物检测试剂盒，其特征在于：所述过量引物的数量是限制性引物的至少10倍。
4.根据权利要求1所述的宫颈癌生物标志物检测试剂盒，其特征在于，高效扩增组还包括：扩增缓冲液、dNTPs和Mg2+。
5.根据权利要求1所述的宫颈癌生物标志物检测试剂盒，其特征在于，焦磷酸检测组还包括：DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶、三磷酸腺苷双磷酸酶、dNTP，以及Klenow酶。
6.根据权利要求1所述的宫颈癌生物标志物检测试剂盒，其特征在于，线性指数PCR扩增的条件包括：95℃预变性5min，60℃扩增循环，72℃延伸10min，4℃保持。
7.根据权利要求1所述的宫颈癌生物标志物检测试剂盒，其特征在于：60℃扩增循环由87℃10s、66℃10s和72℃20s组成一个循环。
8.根据权利要求1所述的宫颈癌生物标志物检测试剂盒，其特征在于：所述DNA样本为经抽提处理的DNA模板。
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