[发明专利]DNA样品的检测试剂盒与检测方法

说明书

本发明涉及一种DNA样品的检测试剂盒与检测方法。本发明的试剂盒包括捕获探针、中转物和终端信号物、未经修饰的固相载体和经亲和物质M1修饰的磁珠；所述捕获探针为DNA片段；所述中转物和终端信号物均为DNA片段，所述中转物一端的核苷酸序列L₁与DNA样品中待测DNA片段的部分核苷酸序列B₂互补配对，所述中转物另一端的核苷酸序列L₂与终端信号物的部分核苷酸序列C₁互补配对；所述试剂盒还包括带有底物的芯片，所述底物为DNA片段；和/或所述试剂盒还包括信号转换物，所述信号转换物为DNA片段；所述终端信号物或信号转换物上标记有亲和物质M2。本发明利用统一的芯片和底物可以检测多个目标物，同时芯片的制备简单化，并且避免了不同底物的交叉污染。

技术领域

本发明涉及一种DNA样品的检测试剂盒与检测方法，具体涉及基于基因芯片的DNA样品的检测试剂盒与检测方法。

背景技术

DNA芯片又叫做基因芯片(gene chip)或基因微阵列(microarray)，寡核酸芯片，或DNA微阵列，它是通过微阵列技术将高密度DNA片段阵列以一定的排列方式使其附着在玻璃、尼龙等材料上面。DNA芯片技术就是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量的DNA探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后与标记的样品杂交，通过对杂交信号的检测分析，即可获得样品的遗传信息。通俗地说，基因芯片是通过微加工技术，将数以万计、乃至百万计的特定序列的DNA片段(基因探针)有规律地排列固定于2c㎡的硅片、玻片等支持物上，构成一个二维的DNA探针阵列，与电子计算机上的电子芯片十分相似所以被称为基因芯片。

利用固定的载体来捕获和检测疾病标记物是现代诊断检测常用的方法。然而，现有方案主要是通过对应特异结合的探测芯片来检测多种疾病目标物，该芯片和底物必须对应于目标检测物。这样会造成同时检测多个目标物时，一块芯片上必须同时种植多种底物。这样的缺点就是芯片的制备过程很繁琐，不易于控制，而且也可能会出现相邻芯片的底物相互污染的现象，最终导致检测结果不准确或不稳定。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种新的DNA样品的检测试剂盒，该试剂盒可利用统一的芯片和底物检测多个目标物，避免了不同底物的交叉污染。

同时，本发明还提供了利用上述试剂盒对DNA样品进行检测的方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种DNA样品的检测试剂盒，其包括捕获探针、中转物和终端信号物、未经修饰的固相载体和经亲和物质M1修饰的磁珠；所述捕获探针为DNA片段，所述捕获探针含有与DNA样品中待测DNA片段的部分核苷酸序列B1互补配对的DNA片段，所述部分核苷酸序列B1含有待测位点；所述中转物和终端信号物均为DNA片段，所述中转物一端的核苷酸序列L₁与DNA样品中待测DNA片段的部分核苷酸序列B₂互补配对，所述中转物另一端的核苷酸序列L₂与终端信号物的部分核苷酸序列C₁互补配对；

所述试剂盒还包括带有底物的芯片，所述底物为DNA片段，所述底物的部分或全部片段与终端信号物的部分核苷酸序列C₂互补配对；和/或所述试剂盒还包括信号转换物，所述信号转换物为DNA片段，所述信号转换物的部分或全部片段与终端信号物的部分核苷酸序列C₃互补配对；

所述终端信号物或信号转换物上标记有亲和物质M2，亲和物质M2与亲和物质M1之间具有亲和力。

作为本发明所述DNA样品的检测试剂盒的优选实施方式，所述捕获探针为DNA片段，所述捕获探针中与部分核苷酸序列B1互补配对的DNA片段的长度为6～20bp。

作为本发明所述DNA样品的检测试剂盒的更优选实施方式，所述捕获探针中与部分核苷酸序列B1互补配对的DNA片段的长度为10～15bp。