[发明专利]一种检测帕瑞昔布钠及合成中间体中有关物质的液相色谱方法

说明书

本发明公开了一种检测帕瑞昔布钠及合成中间体中有关物质的液相色谱方法。本发明采用反相高效液相色谱法，以五氟苯基键合硅胶和十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料，采用紫外检测器，选用含有磷酸二氢钾的流动相进行洗脱，分为两次测定帕瑞昔布钠中间体伐地昔布和帕瑞昔布中的有关物质，即有关物质Ⅰ和有关物质Ⅱ；测定所述有关物质Ⅰ和有关物质Ⅱ的流动相均为甲醇与磷酸二氢钾水溶液的混合溶液。本发明采用液相相色谱法两种梯度方法结合对11种帕瑞昔布钠及其中间体的有关物质完成了同时检测，其中包括了较难分离的5种位置异构体杂质，方法灵敏度高，重复性好，精密度高。

技术领域

本发明属于医药分析领域，具体涉及的是液相色谱同时检测帕瑞昔布钠及其合成中间体中12种有关物质，尤其是5种位置异构体的检测方法。

背景技术

非甾体抗炎药(NSAID)的作用机制是通过抑制环加氧酶(COX)的活性而抑制前列腺素合成，从而发挥抗炎、退热和镇痛效应。常规非甾体抗炎药抑制组成型表达的COX-1，同时抑制炎症相关的或诱导型的COX-2。COX-1会催化产生正常细胞功能所需的前列腺素，因而应用常规NSAID会抑制COX-1从而引起某些毒副作用。与此不同，若药物能够选择性抑制COX-2而基本上不抑制COX-1，则会获得抗炎、退热、镇痛和其它有用的治疗效果，同时降低或消除所述毒副作用。因此，选择性COX-2抑制药物是本领域内一大进步。

帕瑞昔布钠(Parecoxib Sodium)是选择性COX-2抑制药物伐地昔布的水溶性前体药物，是第一个注射用COX-2抑制剂。帕瑞昔布钠在静注或肌注后经肝脏酶水解，迅速转化为有药理学活性的物质伐地昔布。帕瑞昔布可用于术后中重度急性疼痛的治疗。其临床疗效已经在口腔科、妇科、骨科等多种手术术后的止痛治疗中得到证实，并且术后静脉给予本品可减少吗啡的用量，进而提高术后镇痛的质量。帕瑞昔布钠的化学名称为N-[[4-(5-甲基-3-苯基-4-异恶唑基)苯基]磺酰基]丙酰胺钠盐，结构式见下：

尽管目前已经可以大规模地生产帕瑞昔布钠，但帕瑞昔布钠有关物质的分析检测方法仍未被收录于各国药典，而注射用帕瑞昔布钠进口注册标准中主要关注帕瑞昔布钠的降解杂质，对原料药及原料药合成中间体中一些工艺杂质无法有效地分离，更无法准确定量检测这些杂质，所以无法有效保证原料药及制剂产品的质量。经检索，目前针对帕瑞昔布钠有关物质分析方法的相关专利(如CN201510181846.4)即使对部分工艺杂质能够有效分离定量，但对于合成过程中产生的位置异构体的控制不够充分。

本发明能够有效分离帕瑞昔布钠合成过程中潜在的12个有关物质，尤其对合成过程中存在的5个位置异构体有较强的分离能力。

发明内容

发明目的：为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种检测帕瑞昔布钠及合成中间体中有关物质的液相色谱方法。

技术方案：一种检测帕瑞昔布钠及合成中间体中有关物质的液相色谱方法，包括如下步骤：

步骤1：系统适用性实验：(1)分别取各杂质和帕瑞昔布钠的对照品，以甲醇稀释为混合溶液，作为系统适用性溶液；(2)设定液相色谱仪，并将所述系统适用性溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，直至各杂质峰与帕瑞昔布钠峰之间的分离度符合规定；

步骤2：测定实验：(1)取待测帕瑞昔布钠于容器中，加甲醇溶解并稀释，作为供试品溶液；(2)取所述各杂质，加甲醇稀释，作为对照溶液；(3)分别取所述供试品溶液和对照溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；(4)根据对照溶液和供试品溶液的色谱图中的峰，按外标法计算。

作为优化：所述系统适用性溶液为每毫升含有帕瑞昔布钠0.5mg、各杂质均为0.75μg的溶液。

作为优化：在使用液相色谱仪时，注入待测溶液为10μl。

作为优化：所述供试品溶液的浓度为0.5mg/ml，所述对照溶液的浓度为0.75μg/ml。