[发明专利]不同剂型的透明质酸透皮吸收率的分析和比较

说明书

透明质酸(HA)被广泛用于眼科、外科、整形美容、组织工程和再生医学等多个领域。HA分子量较大，不能透过皮肤表面的角质层，所以研究HA剂型的透皮率是一个重要的工作。本发明对HA透皮率进行了分析和比较，不同剂型HA透皮率可为相关行业原料的选择提供实验方法和参考。本发明涉及了不同剂型HA的体外透皮率的研究：未交联HA为20％；未均质HA 10％；均质六次HA 10％；粒径50nmHA脂质体15％；粒径82nmHA脂质体5％。助透剂筛选和条件优化结果显示：HA+9％氮酮透皮率较高。透皮率：未交联HA 0.22％，脂质体HA 2.64％；未交联HA+9％氮酮0.35％，脂质体HA+9％氮酮1.26％。

技术领域

本发明涉及到不同剂型透明质酸的体外透皮吸收情况分析和比较。

背景技术

透明质酸(hyaluronic acid,HA)是一种线性天然大分子多糖，是细胞外基质的主要组成部分，广泛存在于皮肤、眼球的玻璃体液及关节滑膜液等组织中。HA是良好的天然保湿因子，具有良好的生物相容性、非抗原性、粘弹性及降解无毒性等特点，因此广泛用于眼科、外科、治疗关节、整形美容、创伤修复、组织工程等多个领域。

在实际应用中，由于HA相对分子质量较大，不能透过皮肤表面的角质层。脂质体是将药物包封于类脂质双分子层内而形成的微型泡囊体，具有无免疫原性、无毒、易实现靶向性等特点。以脂质体作为载体的药物或其他功效成分易进入角质层，在表皮和真皮内形成药物储库，药物可持续发挥功效，现已成为皮肤病药物治疗和化妆品的研究热点。脂质体对皮肤有优良的保湿作用，尤其是包裹了保湿物质如HA等的脂质体是更优秀的保湿性物质。

本发明的原理：不同剂型的HA与皮肤吸收之间的关系不同，导致被皮肤吸收的程度有所不同，本发明对不同剂型HA的透皮情况进行分析和比较。其中，脂质体的类脂与角质层的脂质相互作用，增加皮肤脂质的流动性，使角质层湿润，水合作用加强，使角质细胞间的结构改变，从而促进药物的透过。

本发明的应用：不同剂型的HA透皮吸收的分析结果可为药品、化妆品、生物材料等行业原料的选择提供实验参考。

发明内容

1.不同剂型HA体外透皮实验：6-8周大鼠处死后皮肤除毛，剥离皮肤，除去脂肪层，生理盐水漂洗，置4℃生理盐水中保存，使用时用滤纸吸干皮肤表面生理盐水。将处理过的大鼠皮肤夹在供给室(R1)和微型接收小室(R2)之间，皮肤角质层面向供给室。

2.分别加入2mL各种剂型的HA于供给室内，恒温水浴35℃。4h后检测接收小室中透过的HA浓度，并计算透皮率。

3.计算方法1(体积计算)：透皮率(％)＝R1(总体积-剩余体积)/R1(总体积)×100；

计算方法2(浓度计算)：透皮率(％)＝(透过后HA浓度×体积)/(透过前HA浓度×体积)×100。

具体实施方式

1.不同剂型HA的制备及标准曲线的建立

1.1未交联HA溶液：称取化妆品级透明质酸，加入适量双蒸水，配制成10mg/mL未交联HA溶液。

1.2未均质的HA溶液：取交联的透明质酸配制成10mg/mL溶液。

1.3均质六次的HA溶液：取10mg/mL未均质的HA溶液用高压均质机反复均质六次。

1.4脂质体HA溶液：称取以下试剂于烧杯中：4.0g磷脂、0.8g吐温80、0.8g胆固醇、20g乙醇，搅拌均匀。取HA溶液于圆底烧瓶中，水浴预热至50℃，将磷脂溶液用5毫升注射器(7号针头)匀速注入HA溶液中，搅拌，直至除尽溶液中的乙醇，使用高压均质机反复均质脂质体混悬液，并检测脂质体粒径。

1.5不同剂型的HA溶液分别建立标准曲线。

2.建造微型透皮吸收仪扩散池的接收室