[发明专利]一种用于检测精子抗体的抗原及其表达载体及其试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种用于检测精子抗体的抗原，其特征在于：所述用于检测精子抗体的抗原为重组IZUMO基因PB功能区基因片段编码的多肽，其氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示的序列，其基因序列为SEQ ID NO:2所示的序列。

2.一种权利要求1所述的用于检测精子抗体的抗原的编码基因的表达载体，其特征在于：所述表达载体为pET30a-IZUMO-His。

3.权利要求2所述的用于检测精子抗体的抗原的编码基因的表达载体的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一，合成重组IZUMO基因PB功能区基因片段：采用基因合成的方式获得PB基因序列并在3’端插入His标签，得到具有SEQ ID NO:2所示序列的基因片段；

步骤二，PB基因片段扩增：以步骤一得到的基因片段作为模板，进行PCR扩增，得到上述用于检测精子抗体的抗原的表达载体。

4.根据权利要求3所述的一种用于检测精子抗体的抗原的表达载体的构建方法，其特征在于：所述步骤二中，所述PCR扩增的条件为：94℃预变性5min，94℃变性40s，60℃退火30s，72℃延伸45s，30个循环，72℃延伸10min。

5.一种用于抗精子抗体检测的ELISA试剂盒，其特征在于：包括以下组成成分：由权利要求1所述的抗原包被的可拆卸酶标板、阳性标准品、阴性对照物、辣根过氧化物酶标记的抗抗体、显色液和终止液。

6.根据权利要求5所述的一种用于抗精子抗体检测的ELISA试剂盒，其特征在于：所述可拆卸酶标板为96孔corning可拆卸酶标板；所述阳性标准品为兔抗人IZUMO重组精子抗原PB功能区多肽抗体，所述阴性对照物为处女血清。