[发明专利]作为免疫增强剂的精胺修饰的普鲁兰多糖

说明书

本发明涉及作为免疫增强剂的精胺修饰的普鲁兰多糖。具体地，在本发明涉及的精胺修饰的普鲁兰多糖中，精胺分子偶联至普鲁兰多糖的羟基或C骨架上；其中所述精胺分子的导入率在1％‑90％之间，特别是在10％‑30％之间。另一方面，本发明涉及包含本发明所述的精胺修饰的普鲁兰多糖的组合物以及其用途。

技术领域

本发明涉及一种精胺修饰的普鲁兰多糖，特别涉及其在制备肿瘤免疫增强剂(也称为免疫促进剂或免疫刺激剂)中的应用。

背景技术

手术切除、化学药物治疗(化疗)及放射治疗(放疗)等传统肿瘤治疗方式以杀灭肿瘤细胞为主，肿瘤免疫治疗则通过对免疫细胞的作用而诱导机体产生针对肿瘤抗原的特异性细胞免疫反应，达到清除肿瘤的目的。由于大多数肿瘤细胞缺少特异性肿瘤抗原，而且在肿瘤微环境中免疫细胞的功能通常会被严重抑制，因此，利用体内多种肿瘤相关抗原(细胞、细胞碎片、细胞分泌的蛋白等)的免疫刺激治疗具有重要作用。

对免疫细胞具有刺激作用的物质包括细菌内毒素(LPS)、CpG、阳离子化合成高分子(如PEI)、阳离子化多糖(如壳聚糖)、纳米颗粒、铝盐佐剂(氢氧化铝、磷酸铝)、MF59(一种包含1％的鲨烯,0.5％的Tween80和0.5％的三油酸聚山梨脂的水包油乳液)、AS03、AS04，等。但现有免疫刺激剂仍存在较多不足，例如诱导细胞免疫应答能力较弱(如铝盐佐剂)，成分较复杂、质量难以控制(如黄芪多糖、人参多糖、灵芝多糖)等，虽然部分免疫增强剂作为疫苗佐剂获得了广泛应用，但在肿瘤免疫治疗领域中应用仍然很少。开发更安全高效的新型免疫增强剂是疫苗研发和肿瘤免疫治疗的迫切需求。

普鲁兰多糖是一种从出芽短梗霉发酵产物中提取的多糖，其制备方法简便，生产工艺成熟，容易获取且成本低，生物相容性好，已广泛用于食品、医药等领域。精胺是生物体内天然存在的一种多氨基小分子，将其连接到普鲁兰多糖分子上可生成精胺修饰普鲁兰多糖(PS)。PS作为基因递送载体已有研究和报道，但作为免疫增强剂的相关应用尚未见公开报道。

发明内容

本发明提供了一种免疫增强剂(也可称为免疫促进剂或免疫刺激剂)，所述免疫增强剂为具有以下特征的精胺修饰的普鲁兰多糖(PS)，其中所述精胺分子直接偶联在多糖的羟基或C骨架上；或者所述精胺分子通过间隔分子(spacer)间接连接在多糖的羟基或C骨架上；其中精胺分子的导入率在1％-90％之间，特别是在10％-30％之间。所述精胺分子的导入率定义为偶联在多糖上的精胺分子占多糖中全部羟基的比例。

本发明首次发现PS具有免疫增强剂的作用，可单独激活一种或多种免疫细胞，提高机体的固有免疫响应；也可以作为免疫佐剂，增强机体对特定抗原的特异性免疫响应。

本发明中所述PS单独使用时，可以有效激活巨噬细胞，提高巨噬细胞的抗原呈递能力和分泌多种对肿瘤具有杀伤作用的细胞因子的能力；也可以促进T淋巴细胞活化，对肿瘤细胞产生杀伤作用。上述功能可有效抑制肿瘤生长，延长荷瘤小鼠的生存期。其中，所述肿瘤为乳腺癌、肝癌、肺癌、黑色素瘤。

另一方面，本发明涉及一种具有免疫增强作用的组合物，其中所述组合物包含本发明所述的PS和其他免疫增强剂(如脂多糖(LPS，由各种革兰氏阴性菌获得))，其中PS在组合物中占20％以上，特别是占50％以上。PS与LPS或其他免疫增强剂联合使用时，可发挥协同效应，进一步提高免疫响应水平，更显著地抑制肿瘤生长，延长小鼠生存期。其中，所述肿瘤为乳腺癌、肝癌、肺癌、黑色素瘤。

另一方面，本发明涉及根据本发明所述的免疫增强剂或免疫增强组合物在制备用于治疗肿瘤的免疫药物组合物中的用途；所述免疫药物组合物包括肿瘤灭活疫苗、肿瘤特异性多肽抗原或肿瘤特异性蛋白质抗原等抗肿瘤免疫治疗药物和基于PS的免疫增强剂或免疫增强组合物。所述肿瘤选自乳腺癌、肝癌、肺癌和黑色素瘤。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：