[发明专利]一种黄精、桑叶和玉竹配伍药物组合物质量检测方法

权利要求书

1.一种黄精、桑叶和玉竹配伍药物组合物质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）薄层色谱鉴别：对黄精、桑叶和玉竹分别进行薄层色谱鉴别，

所述桑叶的薄层鉴别方法如下：

（101A）桑叶供试品溶液制备：精密称量桑叶，加入石油醚，水浴锅回流加热，抽滤，将药渣挥干；然后加入乙醇超声提取，滤过，保留滤液，将滤液蒸发干，得残渣，加水加热溶解，滤过，滤液蒸干；最后加入了甲醇将残渣溶解，得到桑叶供试品溶液；

（101B）黄精、桑叶和玉竹供试品溶液：称取黄精、桑叶和玉竹组合物，用石油醚加热回流提取，弃去石油醚液，挥干药渣；药渣加入乙醇超声提取，过滤，保留滤液，蒸干滤液得残渣；加水溶解残渣，再滤过，蒸干滤液，最后加甲醇使残渣溶解，完成黄精、桑叶和玉竹配伍的供试品溶液的制备；

（101C）阴性供试品溶液的制备：精密称取黄精和玉竹，按照101B步骤制备得到阴性供试品溶液；

（101D）对照药材的制备：取桑叶对照药材，按照101B步骤制备得到对照药材溶液；

（105E）TLC色谱鉴别：采用硅胶板，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸作为展开剂，进行展开，展开完成后晾干，喷以3-6wt.%香草醛硫酸溶液，加热至斑点呈色清晰，最后置于紫外光灯下检视；

其中，甲苯-乙酸乙酯-甲酸的体积比为5:2:1；

所述黄精的薄层鉴别方法如下：

（102A）黄精供试溶液制备：称取黄精，打粉，加入乙醇，回流提取，过滤，将滤液蒸干，加水溶解残渣，用正丁醇振摇提取，蒸发干燥，加入甲醇使残渣溶解，完成供试品溶液的制备；

（102B）黄精、桑叶和玉竹供试品溶液：称取黄精、桑叶和玉竹组合物，用石油醚加热回流提取，弃去石油醚液，挥干药渣；药渣加入乙醇超声提取，过滤，保留滤液，蒸干滤液得残渣；加水溶解残渣，再滤过，蒸干滤液，最后加甲醇使残渣溶解，完成黄精、桑叶和玉竹配伍的供试品溶液的制备；

（102C）阴性供试品溶液制备：精密称取桑叶和玉竹，按照步骤102B方法制备阴性供试品溶液；

（102D）对照药材的制备：精密称取黄精对照药材，按照步骤102B方法制备对照药材溶液；

（102E）TLC色谱鉴别：采用重量比例为硅胶：0.7CMC-Na=1：3的原料制成硅胶板，用石油醚-乙酸乙酯-甲酸=4.8-5.2：1.9-2.1：0.1的混合溶液作为展开剂进行展开；展开完成后，喷3-6%香草醛硫酸溶液显色，在101-107℃加热至斑点呈色清晰，最后置于紫外光灯下检视；

（2）多糖含量测定：

所述多糖含量测定方法为：

（201）对照品溶液的制备：取葡萄糖对照品，干燥至恒重，精密称取，加水，超声溶解，摇匀，配制得到葡萄糖对照品溶液；

（202）供试品溶液的制备：取清蒸黄精，干燥至恒重，精密称取，加入乙醇，水浴锅加热回流提取，趁热滤过，并用乙醇洗涤残渣2~3次，合并乙醇提取液和乙醇洗涤液得到第一提取液；将残渣及滤纸放于烧瓶中，加水，置沸水浴锅中加热回流，趁热滤过，用水洗涤残渣及烧瓶2~4次，合并水提取滤液与水洗液，得到第二提取液；将第一提取液和第二提取液合并，摇匀，定容，得到供试品；

（203）苯酚溶液的配制：称取苯酚，精密量取蒸馏水溶解苯酚，得苯酚溶液，避光密封保存于冰箱中；

（204）显色及测定：分别精密量取葡萄糖对照品溶液和供试品溶液置于试管中，调整浓度，摇匀；将试管放于冷水中，精密量取苯酚溶液，混合均匀，并迅速加入硫酸，振摇均匀，放置于35-45℃水浴20-40min，取出，冰水浴冷却，备用；以相应的试剂为空白对照，于紫外分光光度计上扫描光谱图；

（205）标准曲线的绘制：精密量取对照品溶液配制成梯度浓度对照品溶液，按照步骤204中相同的苯酚-硫酸法显色，然后用紫外-可见分光光度法测定波长480-490nm处吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

（206）结合步骤204的测试结果和步骤205绘制标准曲线，计算确定供试品中的多糖含量；

（3）5-羟甲基糠醛含量测定：采用HPLC检测组合物中5-羟甲基糠醛含量；

（4）其他测试：水分含量测试、灰分含量测试和浸出物含量测试。

2.如权利要求1所述质量检测方法，其特征在于，步骤101A，精密称量桑叶2g，随后加入石油醚30mL，水浴锅上回流加热30分钟，抽滤之后弃去石油醚液；药渣挥干，加入乙醇30mL，超声20分钟，滤过，保留滤液，将滤液蒸发干，留下的残渣加热水10mL，在60℃水浴上边溶解边搅拌，滤过，滤液蒸干，最后加入了甲醇1mL将残渣溶解，完成了桑叶供试品溶液的制备。