[发明专利]化合物的制备方法

说明书

一种式(Ⅳ)化合物的制备方法，包括：将式(Ⅲ)化合物与异硫氰酸荧光素进行加成反应后再进一步与三氟乙酸进行水解反应脱除叔丁酯得到式(Ⅳ)化合物。该方法得到的反应物仅需通过柱色谱纯化即可分离得到纯度为95％以上的式(Ⅳ)化合物。使得该式(Ⅳ)化合物的制备方法成本较低，适宜大规模生产。此外还提供了一种包括上述式(Ⅳ)化合物的制备方法的式(Ⅴ)化合物的制备方法。

技术领域

本发明涉及化合物的制备方法，尤其是[4,7-双-羧甲基-10-(2-荧光素硫脲乙基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1-基]-乙酸以及[4,7-双-羧甲基-10-(2-荧光素硫脲乙基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1-基]-乙酸合钆(Ⅲ)的制备方法。

背景技术

在磁共振成像(MRI)领域，双模态光磁探针具有顺磁性及光学两种特性，既能满足组织内活体观察的需要，又能利用荧光直接观察扩散范围，达到相互验证的目的。[4,7-双-羧甲基-10-(2-荧光素硫脲乙基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1-基]-乙酸合钆(Ⅲ)即为一种双模态光磁探针。目前，常将[4,7-双-羧甲基-10-(2-荧光素硫脲乙基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1-基]-乙酸与六水合氯化钆进行络合反应制得[4,7-双-羧甲基-10-(2-荧光素硫脲乙基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1-基]-乙酸合钆(Ⅲ)。

现有的[4,7-双-羧甲基-10-(2-荧光素硫脲乙基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1-基]-乙酸常通过将DO3A-EA与异硫氰酸荧光素进行加成反应制得(参见Mishra A,Pfeuffer J,Mishra R,et al.A new class of Gd-based DO3A-ethylamine-derivedtargeted contrast agents for MR and optical imaging[J].BioconjugateChemistry,2006,17(3):773-780)，该方法的合成产物难以纯化，需使用制备型HPLC才能达到95％的纯度，制备成本较高，难以大规模生产。

发明内容

本发明的目的是提供一种[4,7-双-羧甲基-10-(2-荧光素硫脲乙基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1-基]-乙酸的制备方法，其产物易于纯化，制备成本低，适宜大规模生产。

本发明的另一个目的是提供一种[4,7-双-羧甲基-10-(2-荧光素硫脲乙基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1-基]-乙酸合钆(Ⅲ)的制备方法，其制备成本低，适宜大规模生产。

本发明提供了一种式(Ⅳ)化合物(即[4,7-双-羧甲基-10-(2-荧光素硫脲乙基)-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1-基]-乙酸)的制备方法，

包括：将式(Ⅲ)化合物与异硫氰酸荧光素进行加成反应后再进一步与三氟乙酸进行水解反应脱除叔丁酯得到式(Ⅳ)化合物

该制备方法的反应产物仅需通过柱色谱纯化即可分离得到纯度为95％以上的式(Ⅳ)化合物，使得该式(Ⅳ)化合物的制备方法成本较低，适宜大规模生产。

在式(Ⅳ)化合物的制备方法的另一种示意性实施方式中，将式(Ⅲ)化合物与异硫氰酸荧光素进行加成反应后再进一步与三氟乙酸进行水解反应脱除叔丁酯的步骤包括：将式(Ⅲ)化合物溶解于四氢呋喃水溶液中，得到溶液J，其中四氢呋喃水溶液中四氢呋喃和水的体积比为3:1至5:1；向溶液J中加入异硫氰酸荧光素，搅拌同时用饱和碳酸氢钠水溶液调节并维持PH在8-8.5之间，直至反应结束后减压蒸馏除去溶剂，得到反应物K；向反应物K中加入三氟乙酸，搅拌20-30h，减压蒸馏除去三氟乙酸后得到反应物L；以及将反应物L用柱色谱纯化，其中用洗脱剂DCM/MeOH：2/1和DCM/MeOH：1/2依次进行洗脱，再经旋转蒸发浓缩并烘干，分离得到式(Ⅳ)化合物。