[发明专利]一种以苦地丁为原料发酵制备杀虫剂的方法

说明书

本发明公开了一种以苦地丁为原料发酵制备杀虫剂的方法，包括以下步骤：(1)将苦地丁洗净后进行巴氏灭菌，打浆后均质成浆液；(2)将苦地丁浆液与地衣芽孢杆菌混合密封发酵，得到一级发酵液；(3)加入辅料植物，同时加入市售解淀粉芽孢杆菌密封发酵1～2d，添加量为2％，过滤得到二级发酵液；(4)加入调节剂调节PH值，搅拌均匀离心过滤得到上层清液；(5)乳化制粉：加入乳化剂反应后再加入淀粉、分散剂和肥皂水充分混合，粉碎筛选得到杀虫剂粉剂。本发明提供一种对蚜虫具有较好的杀灭作用的杀虫剂的制备方法，该方法使用植物促生菌发酵苦地丁，有利活性物质的提取，避免有效物质失活，有利于改善植物生长和增强杀虫效果。

技术领域

本发明涉及利用生物发酵制备杀虫剂的技术领域，特别涉及一种以苦地丁为原料发酵制备杀虫剂的方法。

背景技术

苦地丁是罂粟科紫堇属植物，多年生草本，高10-30cm，基本无毛，根细直，长3-10cm，少分枝，淡黄棕色，茎3-4条，丛生。茎叶互生，叶柄长0.4-4cm，叶片长1.5-3.5cm，灰绿色，二至三回羽状全裂，末裂片倒卵形，上部常2浅裂成3齿。总状花序顶生，长1-6.5cm，果长可达12cm；苞片叶状，羽状深裂；花梗长1-3mm；萼片2枚，小，早落；花淡紫色，长10-12mm；花瓣4，外轮2瓣先端兜状，中下部狭细成距，距长4.5-6.5mm，内轮2瓣形小；雄蕊6，每3枚花丝合生，形成2束；子房狭椭圆形，外被柔毛。蒴果狭扁椭圆形，长1.2-2cm，花柱宿存，内含种子7-12枚。种子扁球形，直径1.5-2mm，黑色，表面光滑，具白色膜质种阜。花期4-5月，果期5-6月。生于山沟、溪流及平原、丘陵草地或疏林下。

苦地丁作为药材可用于治疗清热解毒、消痈肿、主流行性感冒、上呼吸道感染及各种炎症等，但苦地丁中含有多种次生代谢物具有抗虫杀菌的作用，可用于制备杀虫剂。且传统的植物杀虫剂大多使用有机溶剂浸泡或高温煎煮提取植物中的有效物质，耗费资源且容易造成环境污染，影响活性物质的稳定性和遗失活性物质，增加生产成本使得开发应用困难较大，作用效果缓慢，因此给植物源杀虫剂的研发和生产带来了巨大的经济困难。

发明内容

本发明的目的在于：针对上述存在的问题，提供一种对蚜虫具有较好的杀灭作用，生产方式环保无污染节能省力的杀虫剂的制备方法，除此之外，该方法使用植物促生菌发酵苦地丁，有利活性物质的提取，避免物质失活，有利于改善植物生长和增强杀虫效果。

为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

一种以苦地丁为原料发酵制备杀虫剂的方法，包括以下步骤：

(1)将100份苦地丁洗净后进行巴氏灭菌，浸泡于去离子水中进行打浆后均质形成浆液，同时发酵罐清洗干净灭菌备用；

(2)一级发酵：将苦地丁浆液置于发酵罐中，将市售地衣芽孢杆菌菌种活化后加入发酵罐中，添加量为2％，混合均匀密封在37～40℃下发酵3～4d，得到一级发酵液；

(3)二级发酵：向步骤(2)中得到的一级发酵液中加入辅料植物，同时加入菌种活化后的市售解淀粉芽孢杆菌，搅拌均匀后密封在常温发酵1～2d，过滤后得到二级发酵液；

(4)离心调节：向步骤(3)中得到的二级发酵液中加入调节剂调节PH值，搅拌均匀后进行离心过滤得到上层清液；

(5)乳化制粉：向步骤(4)中的上层清液加入乳化剂，于48～60℃边搅拌边反应6～8h，后加入淀粉、分散剂和肥皂水充分混合后进行粉碎筛选，得到杀虫剂粉剂。

优选的，在步骤(1)中，所述巴氏灭菌的温度为68～74℃，灭菌时间为1～2h，所述去离子水的量50份，所述发酵罐灭菌为进行121℃的高温杀菌20～30min。

优选的，所述菌种活化的为取1％的菌种置于培养基中，混合均匀培养至镜检无杂菌且的数量达到5*10⁷～7*10⁷个时完成活化。